Что такое реакция Вассермана? О чем свидетельствует положительная реакция вассермана и что делать при таком результате Положительная реакция вассермана проявляется в виде.

Реакция Вассермана (RW) используется уже более 100 лет и доказала свою эффективность в ранней диагностике сифилиса. Эта методика исследования крови достаточно проста, но в то же время очень надежна, что позволяет широко применять ее по всему миру в усовершенствованном виде. Современные активно используемые экспресс-тесты существенно отличаются от классической реакции Вассермана, но в них закладывается основной принцип этой методики, что позволяет часто давать им прежнее название.

Принципиальный подход

По своей сути, реакция Вассермана - это лабораторный анализ кровяной сыворотки, направленный на определение иммунологической реакции организма на проникновение в него возбудителя сифилиса. При заражении сифилисом происходит характерный процесс. Бледная трепонема (Treponema pallidum), содержит антиген кардиолипин. Кровяная сыворотка за счет наличия реагинов вступает в, так называемую, реакцию связывания комплемента (РСК) с образованием специфического комплекса с этим антигеном, т.е. антитела к трепонеме вступают в соединение с трепонемным антигеном.

Принцип реакции Вассермана основан на выявлении указанной реакции. Если человек заражен сифилисом, то в его крови обязательно появляются антитела к бледной трепонеме, что является физиологическим ответом иммунной системы. Для искусственного провоцирования специфической реакции в кровь вводится препарат, содержащий трепонемный антиген (кардиолипин). Одновременно вводится гемолитическая система для проведения реакции гемолиза, а для сорбции комплексов используется комплемент.

В случае когда возбудитель сифилиса уже проник в человеческий организм, начинается РСК, связывающая антитела в крови с введенным антигеном с образованием специфического комплекса. На эту реакцию расходуется весь вводимый антиген и комплемент. Если антител нет в крови пациента, то кардиолипин вступает в реакцию гемолиза с гемолитической системой, которая полностью его нейтрализует. Проводимый лабораторный анализ выявляет комплексы антитело-антиген, которые обнаруживаются визуально. Концентрация комплексов показывает интенсивность их образования и условно оценивается по количеству знаков (плюс): от (+) до (++++). Исследования на RW можно проводить на кровяной сыворотке или спинномозговой жидкости.

Реакционный состав

Для обеспечения RW в кровь исследуемого человека вводится специальная смесь, которая содержит 3 основных ингредиента: антиген, комплемент и гемолитическую систему. Главную реакцию Вассермана обеспечивает антиген, представляющий собой искусственно приготовленный антиген возбудителя. Он может готовиться в 2 вариантах: обработанная ультразвуком культура бледной трепонемы или кардиолипин, получаемый из бычьего сердца. Чаще всего используется второй вариант, когда препарат приготавливается путем тщательной очистки спиртового липидного экстракта, получаемого из мышечных тканей бычьего сердца. Для повышения активности антигена добавляют фосфолипид, лецитин и холестерин. Необходимая доза антигена обеспечивается разведением его в растворе хлорида натрия.

Гемолитическая система соединяет в себе гемолитическую сыворотку (гемолизин) и эритроциты из крови барана. Сыворотку получают из крови кроликов и ослов, а затем ее иммунизируют эритроцитами барана. Эритроциты выделяются из крови барана в возрасте 1-4 года, а забирается она из яремной вены. Комплемент приготавливается из кровяной сыворотки, получаемой из сердца морских свинок. Для проведения RW указанные ингредиенты берутся в равном количестве - по 0,25 или 0,5 мл.

Как проводится анализ крови

Кровь у пациента на анализ берется натощак или через 7-8 часов после приема пищи. Нельзя брать пробы в следующих обстоятельствах: повышенная температура тела, после недавно перенесенной болезни инфекционного характера, во время месячных у женщин, за 12-15 дней до родов у беременных женщин, сразу после родов, в течение суток после приема алкоголя. Не следует брать анализ у новорожденных детей в первые 2 недели жизни.

Кровь для проведения исследований отбирается из локтевой вены в объеме порядка 9-10 мл с соблюдением всех антисептических правил. У младенцев кровь берется путем надреза пятки специальным скальпелем. На проведение реакции проба должна поступить в течение 2 суток после отбора крови и при условии хранения при температуре не выше 3-4ºС.

Из крови пациента приготавливается сыворотка в следующем порядке. Кровь выдерживается при температуре 37ºС в термостате в течение 18-28 минут, а образовавшийся кровяной сгусток отделяется и поступает на центрифугу, где обрабатывается на скорости порядка 1000 об/мин в течение 14-16 минут. После такой процедуры над сгустком появляется прозрачная кровяная сыворотка, которая и забирается для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, то проводится повторное центрифугирование для их отделения. Окончательно выделенная сыворотка проходит инактивацию при 55-57ºС в течение 28-35 минут. Таким образом удаляется натуральный комплемент и нормализуется состояние глобулинов. Полностью подготовленная кровь хранится в холодильнике не более 7 дней.

Определение реакции Вассермана кровяной сыворотки осуществляется в 3 пробирках: во все пробирки наливается сыворотка, разведенная раствором хлорида натрия в пропорции 1:5, а затем в первую пробирку вводится 0,25 мл трепонемного антигена, во вторую - 0,25 мл кардиолипина, а в третью (контрольную) - 0,25 мл раствора хлорида натрия. Затем во все пробы вводится такое же количество комплемента. Необходимо отметить, что смешивание компонентов заранее не производится.

Следующий этап - первичная инкубация в термостате при температуре 36-38ºС в течение 46-55 минут. После тепловой обработки вводится гемолитический состав (по 0,5 мл в каждую пробирку) с перемешиванием путем встряхивания. Далее осуществляется окончательная инкубация в аналогичных условиях до полного завершения операции гемолиза. Внимательно оценивается наличие или отсутствие гемолиза. Оценку результатов реакции проводят путем сравнения с контрольными образцами. Для этой цели используется 2 дополнительные пробирки: в одну помещается кровь, в которой достоверно установлен возбудитель сифилиса, а в другую - кровь абсолютно здорового человека.

Исследование спинномозговой жидкости

Антитела к бледной трепонемы могут располагаться в спинномозговой жидкости, поэтому иногда исследования на реакцию Вассермана проводятся на пробах этой жидкости. Пробы исследуются одновременно в 3 вариантах: неразведенная спинномозговая жидкость, разведенная в соотношении 1:2 с раствором хлорида натрия и разведенная с тем же раствором в пропорции 1:5. Реакцию проводят аналогично с исследованием кровяных проб, т.е. с трепонемным антигеном и кардиолипином. Комплемент вводится по специальным титрам. Сама методика проведения реакции и оценка исследования спинномозговой жидкости не отличается от исследования на кровяной сыворотке.

Как оцениваются результаты

Нормой или отрицательным результатом реакции Вассермана (отсутствие заражения сифилисом) считается протекание реакции гемолиза. В этом случае в крови отсутствуют антитела к сифилитическому возбудителю, а все введенные антигены нейтрализуются гемолитической системой.

Положительный результат, т.е. наличие заражения, оценивается путем сравнительного анализа с контрольными образцами. Степень тяжести болезни или ее стадия обозначается количеством знаков "плюс":

• (+) или (1+): небольшая задержка гемолиза;
• (++) или (2+): слабо положительная реакция или частичная задержка гемолиза;
• (+++) или (3+): положительная реакция или значительная задержка гемолиза;
• (++++) или (4+): резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза.

Кроме того, существует такое понятие, как сомнительная реакция, обозначающаяся в виде (+/-). Такая реакция требует перепроверки и уточнения. При проведении оценки реакции Вассермана следует учитывать такой факт: у 4-6% здоровых людей наблюдается ложноположительный результат, а у зараженных людей (до 25%) может наблюдаться ложноотрицательный результат в течение 14-18 суток после инфицирования бледной трепонемой. Ложноотрицательные результаты меняются по мере развития болезни: после 4-6 недель болезни до 26% результатов становятся положительными, а к 8-9 неделе почти все они дают положительную реакцию.

Отрицательный результат в скрытом периоде второй фазы сифилиса не всегда свидетельствует об отсутствии болезни. При рецидиве сифилиса реакция становится положительной. После проведения лечебного курса отрицательный результат указывает только на благоприятную тенденцию, но требует перепроверки. Другая проблема оценки эффективности лечения - появление синдрома, так называемого серорезистентного сифилиса, когда после излечения реакция Вассермана все равно дает отрицательный результат.

Реакция Вассермана в большинстве случаев достаточно четко выявляет заражение сифилисом, однако в ряде случаев отрицательная реакция не дает гарантии отсутствия инфекции, также как и положительный результат может появиться и при отсутствии сифилиса.

В частности, ложноположительная реакция может возникнуть в следующих случаях:

Ложный результат может проявиться даже при употреблении жирной пищи непосредственно перед исследованиями.

Результаты реакции Вассермана нельзя расценивать как истину в последней инстанции. Они, скорее, дают импульс для проведения дополнительных обследований. Для этих целей в настоящее время применяются различные трепонемные тесты. К современным методикам экспресс-диагностики сифилиса относятся усовершенствованные аналоги реакции Вассермана: тест RPR, который дополняется трепонемными тестами РПГА.

Реакция Вассермана сыграла огромную роль в развитии диагностирования сифилиса на ранних стадиях. Однако ее результаты не всегда однозначно оценивают наличие болезни, в связи с чем в настоящее время применяются более совершенные способы, принцип функционирования которых взят из классической реакции Вассермана. Исследования данного типа, в основном, продолжают использоваться при контроле лечебного процесса, но могут применяться и для выявления сифилиса.

Необходимо это исследование для того, чтобы подтвердить наличие или отсутствие у человека такого заболевания, как сифилис.

Реакция по Вассерману, что это?

Анализ крови на реакцию Вассермана основан на способности трепонемы, которая является возбудителем сифилиса, вырабатывать антиген кардиолипин. В ответ на его появление в крови иммунная система человека производит антитела, которые связываются с этим антигеном и образуют прочный комплекс.

Если же антитела в крови не образовались, то кардиолипин связывается с эритроцитами и вызывает их разрушение – гемолиз.

Критерием оценки служат титры анализа крови на реакцию Вассермана . Упрощенно, титр – это способ выражения концентрации антител и антигенов, при которой происходит значимая или полная задержка гемолиза. Если сифилис есть, то титр начинает возрастать примерно на четвертой неделе после заражения и достигает своего максимума во вторичном периоде болезни.

А вот в третичном, наоборот, уменьшается.

Говорить о наличии болезни можно, если титры антител в анализе находятся в пределах от 1:2 до 1:800. При этом значение имеет максимальный показатель разведения, при котором еще сохраняется резко положительная реакция.

Зачем сдавать кровь на реакцию Вассермана?

Исследование может проводиться не только при подозрении на сифилис. В обязательном порядке сдают кровь на реакцию Вассермана при беременности . Причем трижды: когда становятся на учет, на сроке в тридцать недель и перед родами.

Также это исследование назначают:

• При поступлении в больницу и перед операциями.
• При устройстве на работу, например, в кафе, рестораны, детские учреждения или магазины.
• Донорам, сдающим сперму или кровь.
• При обнаружении других заболеваний, которые передаются половым путем, например, хламидиоза или трихомоноза.
• При болях в суставах, появлении безболезненных язвочек, длительном, более одного месяца, повышении температуры и при увеличении регионарных лимфатических узлов.

Анализ крови на реакцию Вассермана, как сдавать?

Никаких особых приготовлений этот анализ от вас не потребует. Однако, чтобы максимально снизить риск ошибочных результатов лучше соблюдать несложные правила.

Если вам предстоит сдать кровь на реакцию Вассермана , то:

• За три дня до исследования откажитесь от лекарств.
• Если же это невозможно, обязательно скажите врачу, какие препараты принимаете.
• За 12 часов откажитесь от кофе, крепкого чая и алкоголя.
• Откажитесь от еды за 8 часов до анализа. Лучше кровь на реакцию Вассермана сдавать натощак , так как жирная, белковая пища способна исказить результаты.
• Как минимум за один час до посещения лаборатории откажитесь от сигарет. Не забудьте сообщить врачу о том, есть ли у вас хронические заболевания, такие, например, как сахарный диабет.

Если вы планируете сдать анализ крови на реакцию Вассермана , то цена будет определяться тем, в каком регионе и учреждении вы решили это сделать. В государственных клиниках это возможно сделать бесплатно. В частных стоимость способна колебаться от 300 до 1000 рублей.

Какие могут быть результаты исследования?

В норме анализ крови должен давать отрицательный результат, который означает, что сифилиса нет.

Диагностическая реакция Вассермана давно заняла отдельное место в медицинской науке. Ее изобретателем стал немецкий врач Август фон Вассерман, творец, который разработал это широко известное исследование. Данная реакция Вассермана направлена на диагностику и излечение начальной стадии сифилиса, определить которую обычными исследовательскими процессами не так и просто. Большинство пациентов до сих пор не знают об существовании такого медицинского понятия. В данной статье мы раскроем, что же это такое реакция Вассермана, и в какой области медицины она применяется?!

Что такое Реакция Вассермана?

Началом существования реакции Вассермана принято считать 1906 год. Именно в этот период это исследование было применено впервые, и до сегодняшнего дня, постоянно усовершенствовалось. Данное понятие относится к области венерологии, именно эти специалисты используют его в своих медицинских исследованиях. Реакция Вассермана это перечень лабораторных процессов, которые быстро и качественно диагностируют сифилис, определяют возбудитель данного заболевания – бледную трепонему.

Рассмотрим главные факторы, которые вызвали положительную оценку исследования крови на сифилис:

• Анализ крови на rw дает возможность полностью подтвердить у пациента наличие такого заболевания, как сифилис;
• Конкретные показатели результатов не только подтверждают факт заболевания, но и эффективность его лечения;
• Положительный анализ дает врачам возможность четко установить не только факт заражение, но и его точное время.

Практика таких заболеваний показывает, что чем раньше было диагностировано данное заболевание, тем больше шансов на положительные результаты во время лечения. Если кровь на RW показал положительную динамику, значит антитела уже активно вступили в реакцию, а это свидетельствует о наличии сифилиса. Данная болезнь может проявиться у пациентов, которые перенесли тяжелые вирусные заболевания или пневмонию. При этом нарушается нормальное функционирование организма, и риск возникновения сифилиса возрастает.

Процесс проведения анализа

Для того, что бы результаты проводимого исследования были точными, специалисты рекомендуют сдавать кровь на рв натощак. От последнего приема пищи должно пройти минимум 7 часов, в ином случае, про точность результатов не может идти речи. Существует ряд обстоятельств, когда кровь на анализ брать категорически запрещено, а именно:

• Когда у пациента наблюдается значительное повышенние температуры тела;
• Наличие инфекционного заболевания или его последствий;
• Во время критических дней у женщин;
• На окончательной стадии беременности, а именно, за две недели до родов и после них;
• Если пациент за сутки до забора крови на анализ употреблял спиртные напитки, или другие психотропные и наркотические средства;
• У младенцев в первые недели их жизни.

Во время проведения анализа медицинские работники должны придерживаться всех антисептических правил, которые регламентированы медицинским учреждением. Забор крови у взрослых пациентов берется из локтевой вены, в количестве 8-10 мл, не больше. У младенцев совершенно иная процедура. С помощью специального скальпеля на пятке ребенка делают надрез, с которого берут необходимое количество крови. Для детей необходимый объем крови гораздо меньше, чем у взрослых. Дальше отобрана кровь должна помещаться в специальный тубус, с температурой не выше 3-4?С, и в течении двух суток отправлена на лабораторное исследование.

Если анализы были доставлены позже указанного времени, это может повлиять на эффективность и достоверность результатов, и процедуру придется проводить заново.

Проведение лабораторного исследования анализов также имеет четкую структуру. Сначала из отобранной крови делаю специальную сыворотку. При температуре 37?С кровь помещают в термостат примерно на 20 минут. Образовавшийся комок крови обрабатывается на центрифуге до образования прозрачной кровянистой сыворотки, которая и необходима для проведения дальнейших исследований. Если лабораторная диагностика выявила в сыворотке эритроциты, ее повторно отправляют на центрифугу для их отделения. В течение недели готовую кровь нужно хранить в холодильнике.

Для проведения Реакции Вассермана используют три пробирки с уже обработанной сывороткой. Каждую из них частично заполняют кровью, и на 1:5 разводят дополнительными компонентами, нужными для исследования. В первую пробирку добавляют 0,25 мл трепонемного антигена, во второй сыворотку смешивают с 0,25 мл кардиолипина, третью заполняют 0,25 мл раствора хлорида натрия. После проведения данных процедур во все три пробирки добавляют комплемент, в таком же количестве.

Важно! Практика показывает, что заранее смешивать все эти компоненты нельзя, это нарушит дисбаланс и отрицательно скажется на общих результатах.

Следующая процедура – это процесс инкубации готовых пробирок с сывороткой. Их помещают в термостат для дальнейшей тепловой обработки примерно на час. После первой инкубации в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл гемолитического состава, и после этого еще раз помещаю в термостат. Анализ на RW практически готов. Для установления окончательных результатов используют две дополнительные пробирки. Первую заполняют кровью с положительным результатом на сифилис, вторую – кровью здорового человека. Результат получает в процессе сравнивания готовых анализов с последними двумя образцами.

Оценка анализов реакции Вассермана

Стоит отметить, что лабораторные исследования могут, как подтвердить наличие болезни, так и показать отрицательные результаты. Степень тяжести болезни в медицине принято обозначать знаками «+». При наличии одного знака реакцию можно считать слабо положительной, но если исследования показали «++++» или «4+», реакция считается резко положительной.

В медицине встречается и такой вид реакции, как сомнительный, на практике обозначается знаком «+/-».

При таких результатах проверку анализов стоит повторить, что бы подтвердить или упростить наличие сифилиса. За все время проведения реакции Вассермана специалисты убедились, что инфицирование бледной трепонемой в первые 18 суток могут показывать не достоверные результаты. Например, у 6% совершенно здоровых людей, реакция может показать ложноположительный результат, так как у 20% зараженных пациентов ложноотрицательный. И только со временем можно определить точный диагноз. В течении 3-4 недель болезнь прогрессирует, и ложноотрицательная реакция быстро перерастает в положительную.

Лечение данного заболевания на сегодня дает довольно-таки положительные результаты. Но иногда встречаются и скрытые заболевания, анализы которых показали отсутствие болезни. И если в таких случаях у врачей возникают какие-либо сомнения, то они еще раз проводят исследование.

После первого комплекса лечебных процедур у пациента берут новый забор крови на реакцию. Его положительная динамика свидетельствует о правильном лечении и скором выздоравливании. Но есть случаи, когда процесс лечения все равно приводит к отрицательной реакции. Этот синдром принято называть серорезистентным сифилисом. Тогда специалисты ищут новые, более эффективные методы лечения, которые покажут в результате положительную и благоприятную динамику.

940

Реакция Вассермана - скрининговый тест на сифилис, основанный на реакции связывания комплемента.

Классическая реакция Вассермана не искользуется , вместо нее проводится антикардиолипиновый тест (микрореакция преципитации, Rapid Plasma Reagin, MP, RPR). Но, врачи и медицинский персонал и сегодня используют данный термин, а под «реакцией Вассермана» подрезумевают именно RPR .

Часто, спрашивая в лаборатории: «Вы проводите реакцию Вассермана?» можно услышать «Нет, у нас нет таког о анализа» . Совет - спросите, какие присутствуют в прайсе анализы на сифилис. Если там будет Rapid Plasma Reagin или реакция микропреципитации - это то же, что и реакция Вассермана.

Синонимы: анализ крови Вассерману, проба Вассермана, реакция Борде-Жангу-Вассермана WR, RW, BWR.

Реакция Вассермана – это

простой, но низкоспецифичный анализ для выявления инфицированности сифилисом, контроля успешности лечения и излеченности.

Проба была разработана тремя немецкими учеными Августом фон Вассерманом, Юлиусом Цитроном и Альбертом Нейсером в Институте Роберта Коха в 1906 году. Принцип исследования – реакция связывания комплемента – была предложена бельгийскими иммунологами Жюлем Борде и Октавом Жангу в 1901 году. Поэтому в литературе также встречаются названия «реакция Борде-Жангу-Вассермана» и «Борде-Вассермана» (BWR).

Реакция Вассермана – один из нетрепонемных анализов на сифилис . Выявляет антитела к липидам и липопротеинам попавшим в кровь из поврежденной спирохетой клетки человека.

Диагноз сифилиса можно поставить только на основании комплексного обследования, включающего:

• тщательный расспрос (незащищенные половые контакты, состояние здоровье полового партнера и прочее)
• осмотр (половых органов и анальной области, кожи всего тела, слизистых оболочек ротовой и носовой полости, глаз)
• лабораторные исследования – комбинация как минимум одного трепонемного и одного нетрепонемного теста (реакция Вассермана) (читайте статью «Лабораторные критерии диагноза сифилиса «)

Показания для проведения реакции Вассермана

• незащищенный половой контакт
• наличие симптомов первичного, вторичного и третичного сифилиса – твердый шанкр, язвы в области гениталий и анального отверстия, сыпь на теле
• половым партнерам больных сифилисом и лицам, пребывающем в тесном бытовом контакте с больным сифилисом
• если выявлена другая инфекция с половым путем передачи (гонорея , ВИЧ)
• во время планирования беременности
• во время беременности
• донорам крови и органов (печени, почек, сердца)
• при профилактических осмотрах определенных групп населения (врачи и медицинский персонал, работники общепита, военные)
• перед планированной операцией
• перед вступлением в брак

Реакция Вассермана проводится не для диагностики сифилиса , поскольку она очень неспецифична, а для отбора групп пациентов, которым нужно провести более углубленную диагностику. В то же время ее повторяют в процессе его лечения с целью оценки успешности и контроля излеченности.

Подготовка к сдаче крови на реакцию Вассермана

Для того, чтоб не получить ложноположительный результат реакции Вассермана и проводить ненужные дополнительные анализы, нужно правильно подготовится.

Пауза после хирургических вмешательств, прививок, внутривенного введения любых лекарственных препаратов (антибиотики, цитостатики) до проведения пробы Вассермана должна быть не менее 3-х месяцев.

За две недели до посещения лаборатории нельзя употреблять алкогольные напитки (пиво в том числе), жирную пищу (свадьбы, дни рожденья и обильные празднованья).

Нельзя сдавать кровь во время менструации, в первые десять дней после родов или прерывания беременности. Любые инфекционные заболевания (ОРЗ) или обострение хронических требуют полного излечения.

В состоянии относительного благополучия придите в лабораторию утром, до 11 часов утра, натщесерце (разрешено пить только негазированную воду).

Норма реакции Вассермана

• норма – отрицательно

Даже слабо-положительный результат пробы требует проведения дальнейших анализов.

Динамика реакции Вассермана

• становится положительной с 4-5 (до 8) недель после инфицирования сифилисом бледными трепонемами
• становится положительной через 1-4 недели после появления сифилитического шанкра (сифилитической безболезненной язвы)
• титры снижаются при успешном лечении сифилиса
• при первичном сифилисе результат положителен у 80% инфицированных
• при вторичном сифилисе реакция Вассермана положительна в 100% случаев

Реакцию Вассермана проводят в качественном варианте (результат записывают в виде плюсов, от одного до четырех - +, ++, +++, ++++) и в количественном (точная цифра разведения в котором была видна преципитация - 1:10, 1:20, 1:40, 1, 1:160, 1:320).

Преимущества реакции Вассермана

• простая
• доступная
• дешевая
• быстрая

Все эти качества позволили реакции оставаться на пьедестале в диагностике сифилиса на протяжении практически 100 лет. Но, углубление знаний о строении возбудителя сифилиса - бледной трепонемы и иммунного ответа организма, развитие лабораторных технологий дало новое поколение более точных и надежный тестов.

Недостатки реакции Вассермана

• недостаточная чувствительность на поздних стадиях сифилиса
• ложноотрицательные результаты при значительном количестве антител (феномен прозоны )
• большая вероятность ложноположительных результатов

Причины ложноположительных результатов реакции Вассермана

• жирная пища
• менструация
• употребление спиртных напитков
• вакцинация и прививки
• введение чужеродных сывороток
• наркоз
• беременность
• после родов или абортов
• малярия
• проказа
• системная красная волчанка и другие аутоиммунные и ревматические заболевания
• заболевания системы крови – лейкозы , лимфомы , миелофиброз

Частые вопросы врачу

1. Достаточно ли одной положительной реакции Вассермана для диагностики сифилиса?

Нет, не достаточно. Нужно провести еще как минимум один из следующих анализов:

• реакция иммунофлюоресценции (РИФ - FTA) в различный модификациях
• реакция пассивной агглютинации (РПГА - TPHA)
• иммуноферментный анализ (ИФА - EIA) в том числе рекомбинатный ИФА
• реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
• иммуноблотинг

Реакция Вассермана может быть положительной при многих временных(!) состояниях (например, простуда), поэтому начинать лечение на основании одного анализа – не стоит.

2. Стоит ли делать реакцию Вассермана, если у меня нет симптомов сифилиса?

Анализ провести необходимо, поскольку сифилис может протекать длительно без каких-либо симптомов или они будут замаскированы под незначительное увеличение лимфатических узлов , аллергию, ангину.

3. Когда нужно сдать анализ крови по Вассерману, если у меня был половой контакт с больным сифилисом?

Вероятность заражения при незащищенном половом контакте с больным сифилисом – 30%, инкубационный период сифилиса (от заражения до первых симптомов) от 14 дней до 1,5 месяца (в основном 3-4 недели), реакция Вассермана становится положительной с 30-го дня после вероятного заражения. Но, при большом количестве антител проба будет отрицательной – феномен прозоны, поэтому анализ стоит проводить с разведением сыворотки и при отрицательных результатах первого исследования повторить его через 1 месяц.

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) – это положительные реакции у людей, которые никогда не болели и в момент обследования не болеют сифилисом. То есть специфической инфекции в организме нет и не было, а серологические реакции дают положительный результат.

Ложноположительными, или неспецифическими результатами называют положительные результаты серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией, и не болевших сифилисом в прошлом.

Ошибочный анализ на сифилис из-за технических причин

ЛПР могут быть обусловлены техническими погрешностями и ошибками при выполнении исследований, а также качеством реагентов. Несмотря на многочисленные достоинства диагностикумов для РПГА, ИФА и РИФ и их модификаций, применяемых для диагностики сифилиса, в отдельных случаях отмечаются недостоверные результаты анализов. Это может быть связано как с недостаточным уровнем квалификации и профессиональной ответственности персонала (так называемые небиологические или технические ошибки), так и с особенностями тестируемых образцов (биологические ошибки).

Ошибки небиологического характера могут возникать на любом этапе проведения исследований: преданалитическом, аналитическом, и постаналитическом т.е. при заборе, транспортировке, хранении биоматериала, использовании хилезной, проросшей сыворотки, при неоднократном замораживании и оттаивании тестируемых образцов, а также при использование диагностикумов с истекшим сроком годности и т.д. В частности, несоблюдение условий и сроков хранения диагностических наборов является причиной снижения чувствительности реакции и получения ложноотрицательных результатов.

Ложноположительные результаты может вызвать контаминация сывороток пациентов, серонегативных в отношении бледной трепонемы, следами сывороток серопозитивных лиц, что может иметь место при приготовлении сывороток.

Существует множество других технических ошибок, приводящих к получению недостоверных (ложноотрицательных и ложноположительных), сомнительных результатов исследования. В некоторых лабораториях не осуществляется внутри- и внешнелабораторный контроль качества исследований на сифилис, что ведет к получению диагностических ошибок и неуверенности врачей-лаборантов в результатах анализа.

Источником ошибок при постановке неспецифических тестов могут быть неиспользование контрольных сывороток, неравномерная концентрация антигена в опыте из-за недостаточного перемешивания ее перед использованием, контаминация образцов и посуды микроорганизмами, нарушение сроков и условий хранения компонентов реакции, нарушение техники взятия крови.

В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большее распространение. Но при плохой очистке в смесь антигенов T. pallidum попадают белки Escherichia coli, что приводит к ложной серодиагностике сифилиса у больных эшерихиозом или здоровых, в сыворотке которых обнаружены антитела к кишечной палочке.

В определенной степени к диагностическим ошибкам следует отнести и неправильную трактовку результатов исследования.

Острые и хронические ЛПР

Помимо технических ошибок при выполнении тестов, ЛПР могут быть обусловлены и особенностями организма. Условно ЛПР разделяют на острые (<6 месяцев) и хронические (сохраняются более 6 месяцев).

Острые ЛПР могут наблюдаться при беременности и во время менструации, после вакцинации, после недавно перенесенного инфаркта миокарда, при многих инфекционных заболеваниях. Инфекции, при которых могут отмечаться ЛПР - пневмококковая пневмония, скарлатина, инфекционный эндокардит, туберкулез, лепра, венерическая лимфогранулема, шанкроид (мягкий шанкр), лептоспироз и другие спирохетозы, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, малярия, ветряная оспа, вирусные гепатиты, паротит, корь, респираторные заболевания, грипп и дерматозы.

Острые ЛПР нестойки, их спонтанная негативация происходит в течение 4-6 месяцев.

Хронические ЛПР возможны при аутоиммунных заболеваниях, системных болезнях соединительной ткани, онкологических заболеваниях, хронической патологии печени и желчевыводящих путей, при сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, при заболеваниях крови, при хронических заболеваниях легких, при инъекционном применении наркотиков и др. При большинстве этих состояний выявляют антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM ("реагины").

Хронические ложноположительные реакции могут оставаться позитивными в течение всей жизни.

Хронические ложноположительные реакции могут являться преклиническими проявлениями тяжелых заболеваний. При злокачественных новообразованиях, диффузных болезнях соединительной ткани титр ЛПР может быть очень высоким.

Среди причин хронических положительных реакций выделяют физиологические состояния (пожилой возраст). С возрастом количество ЛПР увеличивается, у женщин они наблюдаются в 4,5 раза чаще, чем у мужчин. В возрастной группе 80-летних лиц распространенность ЛПР составляет 10%.

Причиной ЛПР могут быть частое использование вводимых внутривенно препаратов, частые переливания и инфузии.

Хронические инфекции (туберкулез, лепра, инфекционный эндокардит, малярия), миелома также могут стать причинами ЛПР.

Заражение другими видами спирохет

Ложноположительные реакции трепонемных и нетрепонемных тестов могут наблюдаться при инфекционных заболеваниях, возбудители которых имеют антигенное сходство с бледной трепонемой. Это возвратный тиф, лептоспироз, клещевой боррелиоз, тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта), а также воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий.

Возбудители эндемических трепонематозов (фрамбезия, пинта, беджель) - это трепонемы, которые обладают родоспецифическими антигенами, сходными с антигенами T.pallidum. В связи с этим антитела, образующиеся к ним, способны вступать в перекрестные взаимодействия с антигеном возбудителя сифилиса.

Россия не является территорией, эндемичной по данной группе заболеваний. Эти инфекции встречаются главным образом, в странах Африки, Латинской Америки и Южной Азии, и случаи заболеваний редки в практике лечебных учреждений.

Пациента с положительными серологическими реакциями на сифилис, прибывшего из страны с эндемическими трепонематозами, необходимо обследовать на сифилис и назначить противосифилитическое лечение, если оно ранее не проводилось.

Биологическая ложноположительная реакция Вассермана

Начиная с 1938 года, и особенно во время Второй Мировой войны, в США стали широко проводиться скрининговые серологические исследования для выявления сифилиса. Исследователи сопоставили полученные данные и выяснили, что положительная или сомнительная реакция обнаруживалась у людей не имевших клинических и эпидемиологических признаков сифилитической инфекции или контактов по сифилису. Причем такие результаты возникали гораздо чаще, чем предполагалось ранее. Положительные результаты нетрепонемных тестов с липидными или кардиолипиновыми антигенами (VDRL, в тестах Колмера, реакции Кана) были обнаружены у пациентов с различными заболеваниями, но не имеющих признаков сифилитической инфекции. Биологические ложнополжительные результаты были выявлены у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями.

В русскоязычной медицинской литературе этот феномен получил наименование «биологическая ложноположительная реакция Вассермана » (Б-ЛПРВ), т.к. указанные результаты наблюдались при проведении самого распространенного теста тех времен - реакции Вассермана.

Оказалось, что Б-ЛПРВ может встречаться в двух основных вариантах - остром и хроническом. В первом случае у больных, перенесших какую-либо, но не сифилитическую инфекцию, Б-ЛПРВ исчезает в процессе выздоровления, и длительность ее обнаружения не превышает шести месяцев. Во втором случае Б-ЛПРВ может устойчиво сохраняться в течение многих лет в отсутствие очевидного причинного фактора. В начале 50-х годов было установлено, что наиболее часто хроническая Б-ЛПРВ выявляется при аутоиммунных заболеваниях, особенно СКВ, при которой частота ее обнаружения достигает 30-44%

Ложноположительность нетрепонемных (кардиолипиновых) тестов

Липидные антигены T. pallidum cоставляют значительную часть клетки, однако в организме могут присутствовать и имеющие такое же строение липиды – аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей (в основном липиды митохондриальных мембран).

Сифилитическая инфекция сопровождается образованием иммунных комплексов и аутоиммунным ответом на кардиолипин, фибронектин, коллаген и мышечную креатинкиназу. В нетрепонемных тестах в качестве антигена используют раствор трех высокоочищенных липидов (кардиолипин, стабилизированный лецитином и холестерином) в этиловом спирте. Кардиолипин не является специфичным компонентом для T. pallidum, а также описан как один из фосфолипидов биомембран человека. Поэтому антитела к этому антигену регистрируют в сыворотке практически при любой альтерации клеток человека в результате инфекций и при некоторых физиологических и патологических состояниях.

Так как антиген, используемый в нетрепонемных реакциях, обнаруживается в других тканях, тесты могут давать положительные результаты у лиц без трепонемной инфекции (1-2 % в общей популяции).

Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром - аутоиммунный процесс, встречающийся при заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке, дерматомиозите, склеродермии).

При использовании нетрепонемных тестов (РМП и ее модификаций) ложноположительные результаты могут быть обусловлены наличием в крови антител к ревматоидному фактору, перекрестно реагирующих антител при аутоиммунной патологии («кресс-реактеры»).

Другими факторами возникновения ложноположительных результатов считаются некоторые хронические бактериальные инфекции (лепра и др.), заболевания вирусной этиологии (инфекционный мононуклеоз), системные болезни соединительной ткани.

Причины также могут заключаться в пожилом возрасте (старше 70 лет), беременности, обширной соматической патологии, нарушениях обмена липидов, иммунодефицитных состояниях различной этиологии, системными хроническими заболеваниями сердца, легких.

Среди других причин следует отметить онкологические заболевания, туберкулез, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты, болезнь Лайма, пневмонии, алкоголизм, наркоманию, сахарный диабет, вакцинацию, другие инфекции (малярия, ветряная оспа, корь, эндо- и миокардиты), подагру.

При этих состояниях отмечается развитие иммунологических нарушений, приводящих к аномальной продукции антител, способных перекрестно реагировать и с трепонемными антигенами.

Таблица. Биологические причины ложноположительных реакций при нетрепонемных серологических тестах.

Ложноположительность трепонемных тестов

Проблема усугубляется тем, что трепонемные тесты также могут быть ложноположительными. Причинами могут являться аутоиммунные заболевания, коллагенозы, болезнь Лайма, беременность, лепра, герпес, малярия, инфекционный мононуклеоз, опухоли, наркомания. В последние годы для дифференциации ЛПР за рубежом начали активно использовать иммуноблоттинг - один из самых современных методов диагностики сифилиса.

Сохранение антител после успешного лечения

Специфические диагностические реакции длительное время остаются положительными даже после полноценной терапии. После эффективного лечения сифилитической инфекции, у большинства больных титры в нетрепонемных тестах снижаются в 4 раза через 6–12 месяцев после лечения. Однако, при позднем начале терапии, титры даже в нетрепонемных тестах могут сохраняться на прежнем уровне, но никогда не увеличиваться.

Ложноотрицательные результаты анализов

Различные методы диагностики демонстрируют различную чувствительность и специфичность в зависимости от формы и стадии сифилиса. Вероятность ошибочного диагноза возрастает, особенно в случаях латентного, скрытого, сочетанного течения заболевания.

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной сыворотки, а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.

Ложноотрицательные результаты серологических специфичес- ких реакций (РПГА), вызванные биологическими факторами, могут быть обусловлены конкуренцией между специфическими IgM и IgG за связывание с антигеном на поверхности эритроцитов, а также «феноменом прозоны». В последнем случае агглютинация не происходит из-за гиперпродукции антител к бледной трепонеме, поскольку каждый антиген-рецептор на эритроцитах из-за избытка антител связан с одной молекулой агглютинина, что препятствует образованию «решетки». Замена РПГА на TPPA, т.е. эритроцитов на синтетические частицы, видимо, исключит или минимизирует получении ложноотрицательных результатов.

В ИФА такие реакции можно объяснить наличием серонегативной фазы при первичном сифилисе, а при вторичном - иммунной недостаточностью, наличием ВИЧ-инфекции. При получении отрицательного результата серологических исследований на сифилис следует учитывать свойство бледных трепонем проникать и размножаться в различных органах и тканях - поиск возбудителя в лимфе (лимфатических узлах) в ряде случаев приводит к достоверному результату. Целесообразно повторить также анализ образцов, давших положительный результат. Повторное, через 5–7 и более дней, исследование сывороток, как правило, позволяет получить достоверные результаты.