Бешенство у собак - симптомы, которые должен знать каждый. Вероятность заболевания зависит от

Рабиес – особо опасное заболевание, известное как бешенство у собак и других животных. Что делать в случае заражения, каковы признаки болезни?

О том, что такое бешенство у собак, люди узнали ещё в пятом веке до нашей эры. Болезнь описал в своих трудах Демокрит, а чуть позже это сделал и Корнелий Цельс. В те времена заболевание носило другое название – из-за особенностей течения его прозвали гидрофобией, или водобоязнью.

Долгое время патология была абсолютно неизлечимой, заражение всегда приводило к летальному исходу. Так продолжалось до 1885 года, когда Луи Пастеру удалось создать вакцину. Его разработки используются и сегодня: они помогают полностью побороть болезнь, если симптомы бешенства у человека ещё не проявились.

Степень опасности напрямую зависит от того, как быстро пациент получит врачебную помощь. Если человека укусит потенциально больной зверь, то нельзя стоять и ничего не делать – важно сразу обратиться к специалисту. Именно поэтому необходимо знать, как проявляется бешенство у собак, и не забывать проводить вакцинацию своих питомцев.

Особенности заболевания

Несмотря на то, что чаще всего люди сталкиваются с бешенством по вине собак, болезнь широко распространена и среди других животных. Например, в США и Канаде инфекцию можно подхватить от скунсов или енотов, а также при нападении лисиц и шакалов.

Жители Австралии, Африки, Индии и многих других стран вынуждены опасаться летучих мышей, а в Шри-Ланке поражено множество куниц. Хотя человек практически никогда не заражается от мелких грызунов, некоторые ученые считают, что они представляют собой своеобразные естественные резервуары с инфекцией.

В древности люди больше всего боялись передачи заболевания посредством человеческого укуса, хотя на деле подобное встречается невероятно редко. Тем не менее, каждый год от бешенства умирает примерно 55 тысяч человек, что позволяет отнести патологию к одной из наиболее опасных, наряду с ВИЧ или столбняком.

Виды заболевания

Заразиться бешенством любой живой организм может только одним способом – в результате укуса больного животного. Изредка случается, что слюна или кровь попадают на открытую рану – это тоже приведет к началу болезни.

Инкубационный период бешенства у собак может длиться разное количество времени. У взрослых особей симптомы обычно начинают проявляться спустя 3-6 недель, в то время как для щенков достаточно пяти дней. Иногда болезнь способна очень долго оставаться в скрытой форме. В этом случае симптомы могут проявиться и спустя год после заражения.

Признаки бешенства у собак различаются в зависимости от того, какой тип заболевания развился у животного. Выделяют буйный, тихий, атипичный, абортивный и ремитирующий вариант. Во всех случаях симптомы бешенства у собак весьма несхожи, а потому определить момент заражения, как правило, очень трудно.

Обратите внимание! Животное невозможно вылечить от бешенства. Если оно заболело, то либо погибнет от инфекции, либо его усыпит ветеринар.

Если у питомца проявился какой-либо симптом из тех, что будут описаны ниже, то необходимо изолировать его и обратиться за помощью к специалисту. Если бешенство уже развилось, то спасти собаку нельзя, необходимо думать о здоровье членов семьи и других питомцев.

Общие признаки буйного бешенства

Наиболее часто людям приходится сталкиваться с буйным типом. В этом случае первым признаком бешенства собаки принято считать вялость, вследствие которой питомец часто отказывается выполнять несложные команды или делает это неохотно.

Иногда буйный тип проявляет себя противоположно – животное становится чрезмерно ласковым и навязчивым, часто лижет лицо и руки, что может привести к заражению, если на оголенных участках кожи присутствуют открытые раны.

К последующим симптомам буйного типа относят:

• попытки собаки забиться в темные места;
• ухудшение аппетита, употребление несъедобных предметов;
• повышенное беспокойство, раздражительность и пугливость;
• частый лай, попытки прислушаться к чему-то.

Место укуса доставляет животному массу неприятных ощущений, поэтому оно будет грызть и чесать его. Со временем начнутся проблемы с глоточной мускулатурой, из-за чего собака потеряет возможность глотать воду. Изменится и то, как животное лает – звук станет более хриплым и превратится в вой.

После проявления первых симптомов болезнь будет развиваться на протяжении примерно 3-14 дней. За это время больная собака станет агрессивной, а после угнетенной. Она потеряет силы, будет лежать без движения, а любые внешние воздействия приведут к проявлению буйности.

Важно!

Наконец, произойдет истощение организма, многие мышцы окажутся парализованными. Слюна начнет обильно вытекать изо рта, язык вывалится наружу, глаза станут косыми, а роговица мутной. В конце концов, паралич передастся на другие органы, и скоро животное умрет.

Особенности стадий заболевания

У буйного типа бешенства выделяют несколько стадий заболевания. Первая называется продромальной. Как правило, в этот определенный период люди даже не догадываются о том, что их питомец мог заболеть бешенством. В это время собака просто много лежит и практически не реагирует на слова или прикосновения хозяина.

Если же питомец никогда не был особо ласковым, но внезапно стал требовать общения, то это тоже повод обратиться к врачу, так как смена поведения является признаком продромальной стадии.

Важно! Этот этап длится примерно четыре дня, и к концу периода человек сможет заметить усиление слюноотделения, хотя и не всегда.

Обнаружить болезнь на продромальной стадии хозяевам удается только в том случае, если они знают, что животное было укушено или контактировало с потенциальными носителями инфекции. К сожалению, даже ранняя диагностика не спасет собаку от смерти.

Спустя примерно четыре дня наступает маниакальная стадия. Для этого периода характерно:

• поедание животным несъедобных предметов;
• попытки собаки убежать, причем она может преодолеть множество километров;
• повышенная агрессивность, бросание на людей и других животных без предупреждения;
• отсутствие страха перед человеком.

Этот период наиболее опасен, так как больное животное, из-за особенностей патологического поведения, неумышленно пытается заразить окружающих. Маниакальная стадия длится примерно 3-5 дней, и к её окончанию поведение животного вновь меняется.

На смену буйства приходит спокойствие, начинает развиваться паралич. Поначалу он затрагивает лишь челюсть, не давая собаке есть, пить и даже нормально дышать. Изменяется голос животного, развивается косоглазие.

Наконец, наступает паралитическая стадия, которая заканчивается примерно через два-три дня. В это время животное абсолютно перестает пить и есть, а паралич добирается до других органов и мышц. Это приводит к тому, что животное оказывается в коме, а затем погибает.

Симптомы других видов бешенства

Иногда у собак развивается атипичное бешенство. Его симптомы легко можно спутать с энтеритом, гастритом и другими болезнями ЖКТ, из-за чего многие долго не догадываются о развитии смертельной патологии.

Укушенный питомец будет иметь следующие признаки болезни:

• сильное истощение;
• отсутствие сил;
• общий больной вид;
• понос;
• рвота;
• возможны изменения в привычках питания.

Обратите внимание! Атипичное бешенство может протекать на протяжении трех месяцев или даже полугода.

Тихий вариант заболевания, который также называют паралитическим, поначалу выглядит весьма безобидно. Животное никого не атакует – напротив, оно ласковое, хочет находиться со своим хозяином, аппетит не пропадает. Однако, постепенно на смену этому приходит беспокойство, а затем проявляются и другие симптомы:

• у собаки усиливается слюноотделение;
• очень быстро начинает развиваться паралич различных органов;
• в частности, поражается гортань, из-за чего собака как будто кашляет.

В этом случае органы отказывают особенно быстро – смерть животного наступает уже через два-четыре дня.

Когда делать прививку?

Бешеный пес или любое другое животное никак не сможет справиться с болезнью. Единственный способ предотвратить смерть – это вакцинация собак от бешенства. Хотя это и очень серьёзная патология, нельзя решать привить щенка сразу после рождения.

Как правило, получать вакцину нужно во время второго похода к ветеринару. Например, укол от энтерита или гепатита, сделанный питомцу, приведет к необходимости повторного визита примерно через три недели. Таким образом, вакцина от бешенства для собак ставится в 2,5-3 месяца.

Лучше всего прививаться вовремя, и не только из-за потенциальной опасности болезни. Многие собаководы считают, что лекарство влияет на зубную эмаль щенков, поэтому делают укол до трех месяцев. Именно тогда у малышей начинают меняться зубы.

Как часто делать прививку:

• если щенок получил вакцину в возрасте меньше трех месяцев, то спустя две-три недели нужно повторить процедуру;
• после этого уколы ставят один раз в год.

Некоторые предпочитают подождать с вакцинацией до шести-девяти месяцев. Подобное можно делать далеко не всегда. Например, если питомцу скоро нужно будет пересечь границу, участвовать в выставках, или если он окажется на передержке, то укол необходимо получить до того.

Разумеется, нельзя ждать, если собака находится в группе риска. К ним относятся:

• животные на свободном выгуле,
• охотничьи собаки,
• питомцы, проживающие в местах, где часто регистрируются случаи бешенства.

Хотя вакцина некоторых производителей способна поддерживать невосприимчивость к патологии на протяжении двух лет, необходимо проводить ревакцинацию каждый год, причем, как говорят врачи, «не выходя из него». Это значит, что если питомцу поставили укол, то после прививки должно пройти 11 месяцев, а не 12.

Опасность бешенства для человека

Укус больным животным, делающий лечение невозможным, является смертельным для питомца. Для людей же ситуация несколько иная. После укуса собаки надо сразу же обращаться к врачу, чтобы сделать прививку.

Проявление симптомов бешенства значительно снижает вероятность выздоровления. На поздних стадиях болезнь становится абсолютно неизлечимой.

• От укуса больного животного у человека начнутся судороги дыхательных и глоточных мышц.
• Развивается боязнь воды, звук её течения вызывает спазм гортани.
• Появится агрессия, больной будет много крутиться в постели.

Как и в случае с животными, бешенство приведет к параличу различных органов, а он, в свою очередь, вызовет смерть. Общая продолжительность болезни, как правило, составляет восемь дней, хотя иногда срок может доходить до двенадцати.

Профилактика

Своевременная и регулярная прививка собак от бешенства – единственный способ профилактики данного заболевания. Эту услугу оказывают все ветеринарные клиники и станции.

Сколько стоит прививка от бешенства собаке:

• В ветеринарных станциях возможна бесплатная вакцинация.
• Проведение процедуры на дому с отечественными препаратами требует примерно тысячи рублей и выше.
• Вакцинировать собак в домашних условиях с импортным средством можно, отдав более полутора тысяч.
• Прививки в клиниках, как правило, стоят примерно 500 рублей.

Хотя кому-то цена вакцины может показаться высокой, последствия от её отсутствия несопоставимы с затратами.

В последнее время все чаще встречаются случаи заболевания бешенством. Болезнь смертельна и самое неприятное, что ею может заразиться человек. Если собака заразилась бешенством, то лечение бесполезно. В статье рассказывается о вирусе бешенства, как проявляется бешенство у собак, формы и основные признаки, зачем нужна вакцинация, карантин. Кроме того, прилагаются видео, в которых рассказывается о болезни и методах профилактики.

[ Скрыть ]

Что такое бешенство или гидрофобия?

Возбудителем гидрофобии (бешенства) является нейротропный вирус. Он передается путем укуса. Зараженное животное представляет опасность через несколько дней после укуса, когда вирус попадает в слюну. При этом первые признаки бешенства у собак можно заметить намного позже, поэтому четвероногих помещают на карантин. После того как вирус попадает в мозг и слюнные железы, он начинает активно развиваться, появляются побочные эффекты – энцефалит и паралич, остановка дыхания.

Как проявляется бешенство у собак?

После укуса вирус попадает в кровь и действует негативно на нервную систему. При этом появляется следующие признаки бешенства у собак: боязнь воды, повышенная возбудимость, парализуются дыхательные мышцы и конечности. Из-за нарушения глотательной функции наблюдается обильное выделение слюны. На фото один из признаков бешенства — слюноотделение с пеной.

Цель вируса – попасть в спинной и головной мозг. Чем ближе место проникновения (рана, укус, ссадина) к мозгу, тем быстрее вирус достигнет своей цели и в скором времени появятся признаки заражения гидрофобией.

Молодая собака, которую укусила бешеная, более восприимчива к вирусу, чем пожилое животное. Инкубационный период у взрослого четвероного после укуса в скрытой форме может длиться от 3 до 6 недель. У щенка – 5-7 дней. Порой скрытый период может продлиться до года.

Сколько будет длиться инкубационный период, зависит от количества проникшего вируса. Если укус один, то период может длиться от 1 до 6 месяцев. Если укусы многочисленные, то период инкубации около 2 недель. Исход заболевания в любом случае летальный.

Формы заболевания

Существуют следующие формы заболевания у собак:

1. Буйная. Данная форма болезни имеет три стадии. Во время продромальной стадии наблюдается апатия у питомца, он пытается спрятаться в укромных местах или, наоборот ластится и лижет руки. Можно заметить хватательные движения, животное плохо глотает, выделяется обильно слюна. Для маниакальной стадии характерно апатичное поведение, сменяющееся агрессивным, животное бросается на все подряд, пытается схватить зубами, может бросаться на хозяина. На параличной стадии у собаки отказывают задние конечности. Животное впадает в кому и гибнет.
2. Тихая. Собака не проявляет агрессивности, присутствует аппетит, могут быть проблемы с глотанием. Парализуется глотка, задние конечности и нижняя челюсть. Походка собаки становится шаткой, наблюдается слюноотделение. Животное может поедать несъедобные предметы.
3. Возвратная. При этой форме заболевания возможно чередование стадии выздоровления и возвращения болезни. Каждая новая фаза отмечается большим ухудшением состояния собаки. Во время приступа питомец отказывается от еды, становится малоподвижным, необщительным.
4. Абортивная. Собака выздоравливает на второй стадии болезни. Наблюдается эта форма крайне редко.
5. Атипичная форма протекает вяло, продолжается 2-5 месяцев. Наблюдаются побочные эффекты в виде кровавого поноса и рвоты, энтерит. Эти симптомы затрудняют диагностику заболевания, точный диагноз может дать лишь анализ посмертно по клеткам мозга, но при жизни бешенство анализами не диагностируется.

Больную собаку после укуса помещают на 10 дней в бокс на карантин, чтобы она никого не укусила. При этом анализ не делается, так как это связано с риском для медперсонала. Диагноз подтверждается после смерти животного. Если во время карантина симптомы явно проявились, животное усыпляют.

Как питомец может заразиться?

Бешенство передается от зараженного животного путем укуса или попадания слюны на открытые раны. Важно, знать, как определить бешенство у собаки, чтобы принять необходимые меры. Наиболее подвержены риску заражения бездомные собаки, проживающие вблизи лесов, лесополос, на окраине поселков и т. д. На фото лисица — носитель вируса.

Лисы — разносчики вируса

В этом видео рассказывается, как может заразиться домашнее животное, каким образом вирус передается, приводятся примеры заражения бешенством, объясняется, зачем нужна вакцинация и карантин.

Если вашего питомца укусила бешеная собака, необходимо раны промыть большим количеством мыльного раствора. Питомца следует немедленно доставить в ближайшую ветлечебницу. Так как могут заразиться другие, собаку изолируют от окружающих на время карантина, который продолжается 10 дней.

Передается вирус и без укуса. Играя, четвероногие покусывают друг у друга ушки, облизывают мордочки и глаза. Таким образом, вирус из слюны больного животного, попадает в организм здоровой собаки. Симптомов бешенства в начальной стадии заболевания может еще не наблюдаться, но слюна такой собаки уже содержит в себе вирус. Попадая на слизистую оболочку носа, рта и глаз, вирус найдет микротрещины, через которые он попадет в кровь щенка или взрослой собаки.

Профилактика

Бешенство у собак лечению не подлежит, поэтому единственная возможность защитить домашнего питомца и его окружение – это вакцинация от бешенства. Первую вакцинацию делают щенку до того, как у него поменяются зубы. Это примерно в возрасте трех месяцев. Далее вакцину против бешенства делают регулярно через год.

Если щенку делать прививки против бешенства в раннем возрасте и повторять вакцинацию каждый год, то устойчивый иммунитет у него выработается на третьем году. Поэтому в течение первых трех лет щенку надо все равно уделять внимание. Хотя молодая собака привита, она все равно может заболеть. Если щенка укусила бродячая собака или дикое животное, его надо немедленно показать ветврачу, чтобы проверить на наличие вируса бешенства.

Прививку против бешенства нельзя делать, когда животное болеет. Только когда наступит полное выздоровление, что подтвердит анализ, возможна вакцинация. За 10 дней до вакцинации надо сделать профилактику против глистов и вшей. Вакцинация необходима, так как без нее нельзя посещать общественные места, перемещаться на транспорте, выезжать за границу, заниматься случкой. При безответственном отношении к вакцинации владельцы животных подвергают опасности себя и своего ребенка, который часто находится в близком контакте с домашним питомцем.

После укуса бешеной собаки заразиться может даже привитое животное, если прививка против бешенства сделана в период инкубации.

Извините, в настоящее время нет доступных опросов.

В профилактических целях следует оградить от контакта с бездомными животными. Особенно важна прививка от бешенства собаке, проживающей в сельской местности, на окраине города, вблизи лесов и т. д., то есть в районах, где возможен контакт с дикими животными.

Симптомы бешенства у человека после укуса больного животного?

Для человека бешенство — смертельное заболевание, как и для собаки. Особенно опасен вирус для ребенка, чей иммунитет еще очень слабый. Заразиться ребенок может, когда играет с домашним питомцем. Инкубационный период для человека такой же, как у животных, для ребенка период инкубации меньше.

Первыми симптомами наличия вируса у человека после укуса бешеным животным является появление судорог глотательных и дыхательных мышц. С развитием болезни появляется такие побочные эффекты как: страх воды, возникают судороги гортани при шуме воды. Больные плохо спят, ведут себя агрессивно. Затем возникает паралич и наступает смерть.

Если собака укусила человека, то, неважно, бешеная она или нет, надо принять следующие меры:

• промыть рану мыльным раствором;
• глубокую рану надо промыть струей воды;
• нельзя накладывать швы и прижигать рану;
• обратиться в ближайшую клинику или травмпункт.

У человека есть только трое суток для лечения. Назначаются антирабические уколы. Раньше человеку делали 40 уколов в живот. Сейчас количество сократилось до 7, и делают их, как видно на фото, в плечо.

Если появились симптомы заболевания, то лечение бесполезно. Собакам делают укол смертельной дозы снотворного, чтобы избежать заражения здоровых животных.

Видео «Бешенство у собак»

В этом видео рассказывается, что такое бешенство у собак, какие симптомы и профилактические меры существуют, упоминается о необходимости карантина.

Анализ на бешенство у собак принято брать не только после появления возможных симптомов. К сожалению, если собаку укусило какое-либо животное, будь оно самым спокойным, анализ все же придется сдать, потому, как носителем вируса может оказаться каждое животное, даже самое спокойное внешне. Подробнее о заболевании в нашей статье.

Бешенство — заболевание вирусного характера, передающееся через укус зараженного животного. Вирус поражает центральную нервную систему и зачастую приводит к летальному исходу. Бешенство опасно не только для животных, но и для человека, так как болеют все теплокровные. Именно поэтому необходимо производить анализ на бешенство у собак при первых же симптомах.

Носитель вируса

в основном, длится 3—6 недель, а некоторых случаях может достигать года. В это время никакие симптомы бешенства не проявляются, но животное все равно является носителем заболевания. Именно поэтому, если домашнего питомца укусило невинное на вид животное, необходимо сразу же взять анализ на бешенство у собаки.

Симптомы бешенства

Но, к сожалению, многие люди берут анализ на бешенство у собаки только после появления симптомов . Хотя и о них также необходимо знать. Они могут быть следующими:

собака становится вялой, пассивной, перестает выполнять команды;

собака теряет аппетит;

животное сначала ведет себя чересчур агрессивно, затем становится слишком дружелюбным.

Выше перечислены симптомы заболевания при буйной форме бешенства. Различают 3 формы бешенства:

1. паралитическую;

   атипичную.

Вторая форма бешенства характеризуется появлением судорог и паралича задних конечностей, животное в итоге погибает. Атипичная форма не дает сразу же распознать болезнь, так как характеризуется рвотой и поносом, так же, как гастрит и энтерит.

Способ заражения

Наверняка не все люди знают, как собака может заразиться бешенством, невольно полагая, что только через укус. Однако вирус может передаться и через слюну, которая попала на пораженный участок кожи.

Лечение

К сожалению, лечение бешенства до сих пор не разработано, поэтому ветеринары настоятельно рекомендуют усыплять больных животных, а также своевременно брать у собак анализ на бешенство.

Что делать, если укусила собака?

В первую очередь необходимо:

промыть рану мыльным раствором и теплой водой в течение 10 минут;

сразу же обратиться к врачу.

Если домашнего питомца укусило какое-либо бездомное животное (собака, кошка, мышь и пр.), нужно сразу же сдать анализ на у своей собаки.

Профилактика

Профилактика заболевания заключается в своевременной вакцинации животного. Вакцина не дает гарантии, что собака не заразится, однако у вакцинированной собаки есть гораздо больше шансов выжить, нежели у непривитого пса.

Забота о своем питомце — главная составляющая его здоровья!

Необходимость сделать анализ крови собаки на бешенство возникает в нескольких случаях:

• Животное имеет характерные признаки заболевания.
• Травмы: собака укусила вас или другого человека; вас или вашу собаку укусила другая собака.
• Выезд за границу, в страну, где наличие анализа на бешенство у пса является необходимым условием для ввоза животного.

Бешенство: что нужно знать

Бешенство - вирусное заболевание, как правило, поражающее хищных теплокровных животных: собак, кошек, енотов и других. Некоторые из них, например волки, являются наследственными носителями вируса и, не испытывая сами крайних проявлений болезни, являются источником инфекции.

Известны случаи заболевания и среди домашнего скота. Бешенством болеют также люди, заразившиеся им от домашних или диких животных посредством укуса. В большинстве случаев болезнь оканчивается летально. Способов лечения медицина на сегодняшний день не нашла.

Как определить наличие вируса в крови

Сам вирус бешенства, как и вирус СПИДа и некоторых других болезней никакими анализами в крови не обнаруживается: необходимо сдавать слюну. Конечно, брать ёё у бродячего животного, которое вас укусило, возможности нет.

Но при лабораторном исследовании крови возможно обнаружение специфических антител к бешенству. Они появляются:

• после прививок от бешенства;
• при попадании вируса естественным путём после окончания инкубационного периода.

Наличие результатов анализа на бешенство у собак является их пропуском для въезда в некоторые страны Европы и Азии. Именно по этой причине владельцы животныхчаще всего обращаются в ветклинику. Не каждая клиника имеет право на диагностику бешенства. Ещё недавно производить прививки от бешенства и выдавать соответствующие документы могли только государственные клиники. Теперь ситуация улучшилась, но всё-таки: не в каждой клинике можно сдать анализ или получить документ о прививке. Для этого клиника должна иметь специальный сертификат.

Наличие в паспорте питомца наклейки от вакцины без печати клиники и подписи врача не является достаточным свидетельством проведения вакцинации от бешенства.
Ветеринарная клиника "Добрый Доктор" в Москве обладает правом диагностировать бешенство у животных и проводить вакцинацию против этого страшного заболевания. У нас есть в продаже солидный выбор импортных вакцин, которые отличаются хорошей переносимостью и минимумом зарегистрированных случаев побочных эффектов.

Анализ на бешенство у животных с целью получения сертификата проводится не раньше, чем через 30 дней после прививки и не позже, чем через 1 год после последней вакцинации.

Бешенство (Б) – остро протекающая болезнь теплокровных животных, характеризующаяся поражением ЦНС. Восприимчивы домашние и дикие животные всех видов, а также человек.

Болезнь регистрируется в различных регионах земного шара. Не отмечено случаев распространения болезни в Австралии, Великобритании, Японии. Заболевание почти всегда заканчивается смертью. Имеются фактически документированные случаи выздоровления от бешенства человека и собак после экспериментальной инфекции.

Вирус бешенства (ВБ) относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus. В настоящее время установлено, что ВБ имеет 4 серотипа, что обусловлено, видимо, различием в составе мембранных белков. Все варианты ВБ в иммунобиологическом отношении родственны, но различаются по вирулентности. ВБ обладает ГА и ГАД свойствами. Между инфекционной и ГА активностью существует линейная зависимость. Животные, иммунизированные против бешенства, продуцируют ВНА, КСА, антиГА и литические (разрушающие клетки, зараженные вирусом в присутствии комплемента) АТ.

Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, симптомов болезни, патологоанатомических изменений (они имеют меньшее значение) и, главным образом, результа­тов лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика заключается в исследовании головного мозга животных с целью выявления вирусного АГ в ИФ, РДП, обнаружении те­лец Бабеша - Негри и биопробе на белых мышах.

В Российской Федерации в настоящее время организовано производство наборов для диагностики Б в ИФ и РДП в ВНИТИБП и КазНИВИ.

Выделение вируса. В лабораторию для исследования направляют свежие трупы мел­ких животных, от крупных животных - голову или головной мозг. В некоторых случаях до­пускается консервирование головного мозга в 50%-ном глицерине. Труп или голова должны быть тщательно упакованы в полиэтиленовый мешок, мозг - в банку с притертой стеклянной или резиновой пробкой, залитой парафином. Материал упаковывается во влагонепроницае­мую тару. Для вирусологических исследований пригоден только не консервированный мозг. Необходимо помнить, что вскрытие трупа, извлечение мозга и другие операции с патологи­ческим материалом следует проводить в условиях стерильности и строгого соблюдения мер личной профилактики: прочно фиксируют голову животного, защищают руки 2-мя парами перчаток (хирургические и анатомические), для защиты глаз надевают очки, а на нос и рот-6-слойную марлевую повязку.

Лабораторные исследования материала на бешенство проводят вне всякой очереди; результаты немедленно сообщают врачу хозяйства и главному врачу района (города).

Индикация и идентификация вируса . Порядок проведения исследований: из каждого отдела головного мозга левой и правой сторон (аммонова рога, мозжечка, коры полушарий и продолговатого) готовят по 4 мазка-отпечатки для ИФ и обнаружения телец Бабеша - Негри; с мозговой тканью ставят РДП; при отрицательных результатах ставят биопробу.

Обнаружение специфических телец-включений . Мазки-отпечатки окрашивают по Селлерсу, Муромцеву или другими методами. После окрашивания препараты просматрива­ют в световом микроскопе с иммерсионной системой. Положительным результатом считают наличие специфических телец Бабеша - Негри (при окраске по Селлерсу - четко очерченные овальные или продолговатые гранулярные образования розово-красного цвета в протоплаз­ме, при окраске по Муромцеву - светло-фиолетовые с темно-синими включениями тельца Бабеша - Негри, чаще они расположены вне нервных клеток.

Наиболее характерная особенность телец Бабеша - Негри - их внутренняя структура, по­зволяющая абсолютно точно дифференцировать их. Внутри видны маленькие зернышки - базофильные зернистости темно-голубого, даже черного цвета величиной 0,2-0,5 мкм.

Диагностическая ценность обнаружения телец-включений для доказательства заражения ВБ общепризнана. Однако и у здоровых животных, в особенности у кошек и белых мышей, имеются образования, присутствие которых может вызвать диагностические затруднения. В отдельных случаях в мозге кошки можно с уверенностью дифференцировать подобные включения от телец Бабеша - Негри, и здесь рекомендуется воспользоваться методами иден­тификации, в особенности ИФ. Равным образом и у собак, погибших в результате отравле­ния змеиным ядом или поражения электрическим током, можно найти тельца-включения, напоминающие тельца Бабеша – Негри. Тельца Бабеша - Негри выявляют лишь в 65-85% случаев бешенства, поэтому отсутствие их не является отрицательным ответом, и материал исследу­ется в других тестах (ИФ, РДП, биопроба).

ИФ. Один из основных тестов при диагностике Б. При высококвалифицированном вы­полнении получают в 99-100% совпадения с методом биопробы. Обычно в диагностической практике используют прямой метод ИФ, который проводят с применением антирабического флюоресцирующего Ig. Фиксацию препаратов в охлажденном (8-10°С) ацетоне проводят не менее 4-х ч. В качестве отрицательного контроля используют мазки-отпечатки головного мозга здоровых белых мышей. Учитывают результаты визуально в люминесцентном микро­скопе на основе оценки интенсивности свечения комплекса АГ-АТ. АГ ВБ выявляется в ви­де ярких желто-зеленых или зеленых гранул различной формы и величины в клетках (чаще вне клеток). Диагноз считают установленным, если в нескольких полях зрения обнаружи­вают достаточное количество (не менее 10) типичных гранул с ярким зеленым свечением или множество мельчайших точек, В контроле подобного свечения не должно быть.

Для доказательства специфичности свечения комплекса АГ-АТ используют метод по­давления ИФ, который заключается в способности рабического АГ, связанного с нефлюоресцирующими AT, вторично не вступать в соединение с флюоресцирующими специфиче­скими AT. Для этого на фиксированные препараты, приготовленные из исследуемого голов­ного мозга, наносят 5%-ный антирабический нефлюоресцирующий Ig, выдерживают 30 мин при 37°С во влажной камере, промывают физраствором, а затем окрашивают флюоресци­рующим антирабическим Ig общепринятым прямым методом. В обработанных таким обра­зом препаратах флюоресценции не должно быть.

Метод ИФ дает возможность обнаруживать ВБ в клетках роговицы глаз и предвари­тельно поставить диагноз прижизненно: во время болезни животных, а также за 1-2 дня и более до клинического её проявления. Метод может быть использован для исследования по­дозреваемых в заболевании Б животных, а также клинически здоровых собак и кошек, по­кусавших людей и животных. Для этого готовят отпечатки с роговицы, соблюдая все прави­ла личной безопасности, раскрывают глазную щель животного большим и указательным пальцами и на слегка выпяченное глазное яблоко надавливают поверхностью предметного стекла, отступив 0,5 см от конца. Нужно следить, чтобы животное не моргало третьим ве­ком, так как со стекла удаляются эпителиальные клетки и получается некачественный мазок. С каждого глаза делают не менее 2 препаратов, содержащих по 2 отпечатка. Для кон­троля аналогичным образом готовят отпечатки роговицы от здоровых животных. Их можно приготовить в хозяйстве. Отпечатки высушивают на воздухе, фиксируют в ацетоне в тече­ние 4 ч при 4°С, упаковывают и отправляют в лабораторию. Окрашивают препараты, как при ИФ, по общепринятой методике.

В препаратах, полученных от больных животных или находящихся в конце инкубаци­онного периода болезни, в цитоплазме многих эпителиальных клеток наблюдаются разной формы ярко светящиеся гранулы разного размера - от пылевидных точек до 2 мкм и более. С целью получения достоверных результатов в каждом препарате просматривают по 50-100 клеток, а всего от животного - не менее 200-400 клеток. Результаты микроскопии считают положительными, если в отпечатках роговицы животного обнаруживают 11% и более кле­ток с характерными очажками свечения. Необходимо иметь в виду, что в препаратах от здо­ровых животных (контроль), вследствие аутофлюоресценции, могут встречаться единичные клетки с подобными по форме и свечению очажками.

Важно отметить, что ИФ дает возможность ускорить ответ при окончательной постанов­ке диагноза путем биопробы, поскольку диагноз при Б может быть установлен только на 4-8-й день после заражения мышей исследуемым материалом, а инкубационный период забо­левания мышей может достигать и 20 дн. ИФ может выявлять ВБ в тканях подчелюстной слюнной железы. Из подчелюстных слюнных желез готовят препараты-мазки, беря матери­ал не менее чем из 6 разных участков железы, так как распределение в ней вируса нерав­номерно. Часто, чтобы получить отпечаток, приходится делать сильный нажим, поскольку из-за обилия муцина на стекле остается мало материала.

Показана возможность идентификации ВБ в коже методом ИФ, С этой целью берут пробы кожи головы, а также фолликулы сенсорных и тактильных волос морды или лате­ральных сенсорных сосочков (на щеке собаки). Пробы хранят при -20 или -70°С. Из них де­лают криосрезы, которые обрабатывают флюоресцирующим глобулином. Результаты ИФ анализа, полученные при идентификации ВБ в коже, в высокой степени коррелируют с дан­ными, полученными при исследовании мозга того же животного. Показана близкая корре­ляция между обнаружением АГ вируса в пробах мозга и тканях губы методом ИФ.

РДП. Применяют для обнаружения АГ ВБ в неконсервированном головном мозге жи­вотных, павших от уличного бешенства, или мышат, используемых в биопробе. РДП ставят микро­методом на предметных стеклах, используя 1-1,5%-ныЙ агаровый гель по общепринятой ме­тодике. Наибольший процент положительных результатов выявляют при использовании следующего трафарета: А - аммонов рог (правая сторона); В - кора головного мозга (правая сторона); С - мозжечок (правая сторона);
Д - продолговатый мозг (правая сторона); + (плюс) - положительный контроль; - (минус) - отрицательный контроль; 1, 2, 3, 4 - лунки с разведе­нием специфического иммуноглобулина 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 соответственно

Из каждого отдела головного мозга с помощью пинцета готовят гомогенную пастооб­разную массу, которую и помещают в соответствующие лунки. От мышей исследуют весь головной мозг. Из отделов головного мозга левой стороны готовят АГ аналогичным образом (на каждую экспертизу в общей сложности требуется 4 предметных стекла с агаровьм ге­лем). Реакцию учитывают через 6, 24, 48 ч. При наличии 1 или 2-3 линий преципитации между лунками, содержащими АГ и иммуноглобулин, реакцию считают положительной.

РДП проста по выполнению и специфична, но процент выявления вирусного АГ в ис­следуемом материале составляет 45-70. При исследовании головного мозга мышей, полу­ченного при положительной биопробе, РДП выявляет до 100% случаев. Отсутствие в иссле­дуемом материале телец Бабеша - Негри, специфической флюоресценции и отрицательная РДП не дают основания исключить наличие вируса. В этом случае окончательный диагноз ставят по результатам биопробы на белых мышах с последующей идентификацией вируса.

Биопроба. Принято считать, что биопроба является более эффективным методом, чем обнаружение телец Бабеша - Негри, ИФ и др. Однако и она в отдельных случаях оказыва­лась отрицательной, несмотря на подтверждение диагноза Б путем обнаружения телец-включении и ИФ. Процент отрицательных результатов по биопробе колебался от 1,3 до 12.

Сведения о различной эффективности биопробы могут быть объяснены рядом факторов: выбора экспериментального животного, количества их в опыте, способа заражения, способа и срока хранения материала до поступления в лабораторию. Может играть роль и явление интерференции инфекционных частиц неактивными частицами, если для инокуляции ис­пользуют недостаточно разведенный материал.

В мозге и слюнных железах лисиц и скунсов, павших от бешенства, обнаружено вещество, ингибирующее инфекционность вируса, что не позволяет провести диагностику болезни у этих животных методом внутримозгового заражения мышей. Наличие ингибирующего вещества в исследуемом материале не препятствует выявлению вирусного АГ методом ИФ; для скун­сов и лисиц это самый чувствительный метод диагностики.

Из животных всех видов (кролики, морские свинки, взрослые белые мыши и хомячки), использованных для биопробы, многие отдают предпочтение мышам-сосунам, поскольку они более чувствительны к разным штаммам ВБ и менее опасны в работе. Сирийские хо­мячки по чувствительности не уступают мышам, но они менее доступны.

РСК. Выявление специфического АГ в РСК при диагностике бешенства применяется реже, чем другие методы. Из присланного для исследования мозга готовят АГ. Для этого мозговую ткань (особенно богаты АГ, связывающим комплемент, кусочки таламуса и стволового от­дела мозга) растирают в вероналовом буфере в соотношении 1:10 и оставляют при комнат­ной температуре на 1 ч, после чего суспензию инактивируют при 56°С в течение 5 ч. Такая обработка убивает вирус и снимает антикомплементарность мозговой ткани, не повреждая специфический АГ. Суспензию центрифугируют 15 мин при 3500 мин- 1 из надосадочной жидкости, которая представляет собой материал для исследования на наличие АГ, готовят 2-кратно возрастающие разведения от 1:2 до 1:64 и используют для исследования в РСК.

ИФА. В ИФА специфическое окрашивание АГ в клетках мозга павших от бешенства животных выявляют как в свежевзятых, хранившихся в глицерине, а также в пробах, хранившихся без глицерина при 20°С 8-18 ч. Данный тест пригоден для рутинной диагностики бешенства у животных, для выявления АГ ВБ в тканевых парафиновых срезах при фиксации препаратов 10%-ным р-ром формалина с рН 5,3 и последующей обработки препаратов, заключенных в парафин, пепсином.

В отличие от РН на мышах и в культуре клеток ИФА позволяет выявить AT у животных в течение нескольких часов, ИФА - наиболее перспективный лабораторный метод обнару­жения AT и индикации самого вируса. Экспресс-методом диагностики бешенства является тех­ника захвата и метод ИФ для выявления АГ ВВ. Доказано, что метод выявления АГ ВБ в парафинизированных срезах пероксидазо-антиперокисдазным методом значительно пре­восходит метод ИФА. В 1987 г. создан набор для быстрой энзимиммунодиагностики бешенства (RREID), приемлемый для эпидемиологических и лабораторных исследований.

Вариантная идентификация с помощью монАТ. С помощью монАТ к гликопротеинам ВБ селектированы АГ варианты, среди которых выделены фенотипически термола­бильные (авирулентные) варианты. При использовании 2-х групп монАТ показано, что штаммы дикования отличаются от шт. Fixe (Пастера), CVS, Flury HEP, ERA и "утиных" штаммов по АГ детерминантам. Изучение с помощью монАТ 7-ми штаммов, выделенных от больных Б людей, позволило выявить определенные отличия их от вакцинного штамма в отношении АГ детерминант.

Общепризнано, что AT отличия между дикими штаммами удается обнаружить, исполь­зуя монАТ против нуклеокапсидного AT N, которые реагируют с цитоплазматическими включениями зараженных вирусом клеток; против гликопротеина (G АГ), которые реаги­руют с мембранами инфицированных клеток, лизируют эти клетки в присутствии компле­мента и нейтрализуют вирус. В связи с возможной АГ вариабельностью поверхностного гликопротеина ВБ из различных географических зон в качестве протективного АГ исполь­зовали рибонуклеопротеин, характеризующийся консервативностью АГ структуры. Таким образом, не только G белок, но и РНП ВБ обладают протективной активностью.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика . Эти методы для бешенства нетипичны, поскольку используются только с целью проверки поствакцинального иммунитета. Для обнаружения и титрования поствакцинальных AT ис­пользуют РН, которую ставят общепринятым методом. В качестве АГ используют фиксиро­ванный ВБ. РН на клетках ВНК-21 была более чувствительной, чем непрямая ИФ при выяв­лении AT в сыворотках вакцинированных лис. Кроме того, предложены РТГА и ELISA.

РТГА. Пока еще не нашла широкого применения в диагностической практике из-за на­личия в сыворотках крови неспецифических ингибиторов, к которым ВБ высокочувствите­лен, а главное, ГА АГ, не подвергавшиеся достаточной очистке, обладали низкой чувстви­тельностью. Для приготовления ГА АГ ВБ предложено использовать шт. Москва, выращен­ный в культуре клеток ВНК-21, после его обработки сапонином с последующей очисткой и концентрированием. ГА отделяют от других компонентов вириона ультрацентрифугирова­нием. Полученный препарат имел степень очистки 99,92%, обладал высокой ГА активно­стью (1:128), хорошо сохраняющейся в течение 1 мес при рН 5-9.

Перед постановкой РТГА следует проводить умеренную 2-кратную трипсинизацию гу­синых эритроцитов для их сенсибилизации. При использовании 0,25%-ной взвеси трипси-низированных эритроцитов (лучше 10 7 клеток в 1 мл) чувствительность РТГА повышается в 4 раза. Для разбавления АГ и сывороток применяют боратно-солевой р-р (рН 9) с добавле­нием 0,4% бычьего сывороточного альбумина. Взвесь эритроцитов готовят в солевом р-ре с кислым рН, чтобы после соединения со смесью вируса и сывороток, рН которой 9, оконча­тельный рН установился бы в пределах 6,2. После внесения в лунки суспензии эритроцитов панель встряхивают, заклеивают прозрачной пленкой и ставят на лед. Результаты РТГА учитывают через 40-50 мин, а с эритроцитами 2-дн цыплят или макаки-резус - через 1-1,5 ч.

Разработан радиоиммунологический анализ, основанный на способности AT связы­ваться с меченым 125 1-АГ ВБ. Меченый IgG, выделенный из антирабической гипериммун­ной сыворотки, можно применять для обнаружения АГ ВБ твердофазным РИА. Лучшие ре­зультаты получены при использовании фосфатно-солевого р-ра (рН 6,0) с ионной силой 0,01 М и меченого IgG с активностью 200-250 тыс. имп./мин.

Твердофазный конкурентный РИА применим для выявления антирабических AT в сы­воротке и гибридомных супернатантах.

Дифференциальная диагностика . Необходимо исключить болезнь Ауески, при кото­рой больные животные неагрессивны, не бывает извращения аппетита. У собак исключают нервную форму чумы. Подозрение на бешенство может возникнуть при инфекционном энцефаломие­лите лошадей. Комплекс лабораторных исследований позволяет поставить точный диагноз на бешенство. Предложен новый метод дифференциации различных штаммов ВБ, основанный на рестриктазном расщеплении продуктов амплификации в ПЦР сегмента гена N.