Подсчет клеточных элементов мазка и представление морфологического состава его в виде соответствующих индексов позволяют дать более достоверную оценку наблюдаемой картины для целей гормональной цитодиагностики.
Индекс созревания - ИС (в иностранной литературе: Maturation Index - MI) представляет собою численное соотношение всех парабазальных промежуточных и поверхностных клеток в вагинальном мазке, выраженное в процентах.
Для правильного определения ИС цитолог должен иметь хорошее представление о формах и виде клеток разных слоев эпителия. ИС определяется при сосчитывании 100-200 клеток в мазке не менее чем в 5-8 полях зрения, так как одно-два поля зрения могут дать неправильную информацию.
ИС обозначается в виде формулы, где слева записывается количество парабазальных клеток, посередине - промежуточных, справа - поверхностных. В случае отсутствия какого-либо вида клеток в соответствующем месте ставится цифра 0.
Примеры различных степеней пролиферации, обозначаемых индексом созревания:
1. Выраженная атрофия - в мазках обнаруживаются только парабазальные клетки, промежуточные и поверхностные клетки отсутствуют, ИС= 100/0/0.
2. Умеренная атрофия - в мазках наряду с парабазальными имеются клетки промежуточного слоя, поверхностные клетки отсутствуют, ИС равняется 70/30/0 или 50/50/0.
3. Умеренная пролиферация - парабазальные клетки отсутствуют, в мазке "преобладают промежуточные клетки, ИС = 0/80/20. Усиление пролиферативных изменений может быть обозначено стрелкой, направленной вправо, например ИС = 0/50/50.
4. Выраженная пролиферация - парабазальные клетки отсутствуют, в мазке преобладают поверхностные клетки, ИС равняется 0/20/80 или 0/0/100. Уменьшение пролиферации может быть обозначено стрелкой, направленной влево; например, при исходном ИС, равном 0/0/100, наступающее уменьшение пролиферативных изменений выглядит как 0/20/80, затем 0/60/40 и т. д.
Таким образом, изменение степени пролиферации вагинального эпителия, оцениваемое по мазкам («сдвиг вправо» или «сдвиг влево»), может быть обозначено как соответствующим изменением процентного соотношения определенного вида клеток, так и стрелкой, направленной в ту или иную сторону.
С помощью индекса созревания легко и понятно могут быть отражены кольпоцитологические изменения, возникающие под влиянием эндогенной и экзогенной гормональной стимуляции, в частности при лечении эстрогенами, что является большим преимуществом по сравнению с классификацией Geist, Salmon. Однако с помощью одного лишь индекса созревания нельзя раскрыть специфику действия каждого из гормонов, поскольку определение ИС основывается только на морфологических особенностях клеточного состава вагинального мазка.
Кариопикнотический индекс - КИ (в иностранной литературе - KI) представляет собою процентное отношение всех отслоившихся зрелых поверхностных клеток с пикнотическими ядрами к клеткам, содержащим везикулярные ядра диаметром более 6 мк.
В процессе созревания эпителия происходят структурные изменения в строении ядра клеток. Нежная сеть хроматина ядра по мере созревания клетки постепенно превращается в маленькую бесструктурную массу хроматина - происходит так называемый кариопикноз, т. е. конденсация хроматиновой структуры ядра, завершающая жизнедеятельность клетки.
Диаметр ядра можно измерить с помощью микрометрической линейки или определить визуально при увеличении 40x10 или 40х х15. При этом пикнотические ядра кажутся сине-черными в силу своей гомогенности и имеют округлую или слегка овальную форму; ядра, сохранившие сеть хроматиновой структуры, не имеют такой плотности и гомогенности.
КИ при нормальной реакции вагины изменяется в строгой зависимости от силы гормонального влияния. Непрерывная эстрогенная стимуляция вызывает повышение КИ. По этой клеточной реакции может быть произведена оценка продолжительности действия эстрогенов и их синтетических аналогов. Прогестерон и андрогены обладают выраженной способностью подавлять пролиферативные изменения, вызванные эстрогенами. По степени уменьшения КИ после действия андрогенов или прогестерона можно оценить эффективность действия этих гормонов. По этому признаку, т. е. по способности вызывать регрессию КИ, можно подобрать терапевтические дозы гормонов-антагонистов, которые будут подавлять сильную пролиферацию, вызванную эстрогенами.
У женщин репродуктивного периода с помощью подсчета КИ можно определить характер менструального цикла , выявить наличие овуляции, установить чрезмерную пролиферацию. Высокие степени КИ в детском возрасте и в глубокой менопаузе позволяют сделать заключение о патологической пролиферации, не свойственной для данного возраста.
Таким образом, определение ядерного пикноза является одним из основных тестов в гормональной кольпоцитодиагностике. Преимущество его заключается в том, что он не требует никаких сложных методов окраски и фиксации, легко определяется при фазово-контрастной микроскопии и даже в нативном препарате. Однако для практических целей лучше произвести окрашивание препарата гематоксилин-эозином или гематоксилином Шорра и исследовать мазок при увеличении 40x10 или 40х15 при помощи бинокулярного микроскопа.
Основные критерии, которые должны учитываться при определении ядерного пикноза:
1) уменьшение диаметра ядра до 6 мк и меньше;
2) исчезновение тонких хроматиновых структур (пикнотические ядра представляются в виде гомогенных темных, хорошо очерченных круглых точечных образований);
3) гиперхроматоз.
На основании полученных при подсчете данных ядерного пикноза составляются пикнограммы, которые используются для характеристики менструального цикла и его нарушений, а также для контроля при проведении гормонального лечения.
Эозинофильный индекс - ЭИ (в иностранной литературе - EI) представляет собой процентное отношение всех зрелых отделившихся поверхностных клеток с эозинофильной окраской цитоплазмы к зрелым поверхностным клеткам с базофильной (цианофильной) окраской цитоплазмы. При подсчете ЭИ величины ядер поверхностных клеток во внимание не принимаются. Зрелые поверхностные клетки влагалищного эпителия способны к дифференцированному окрашиванию цитоплазмы.
Для дифференцированной окраски мазков вагинального эпителия применяются различные методы.
Для правильного цитологического заключения важно, чтобы применяемая методика окраски мазков отражала гормональную стимуляцию и, в частности, влияние эстрогенов. Эталоном цветовых изменений цитоплазмы клеток для любой методики полихромной окраски могут служить выверенные кривые эозинофильного индекса при нормальном менструальном цикле в репродуктивный период жизни у здоровых женщин.
При изучении характера менструального цикла по цитологическим данным, а также при проведении гормональной терапии динамика числовых показателей эозинофильного индекса изображается графически. Полученные изменения лучше всего сопоставлять с определенными кривыми ЭИ при овуляторном менструальном цикле (при той же полихромной окраске). Всякое увеличение показателей ЭИ выше данных, имеющих место при нормальном менструальном цикле, должно расцениваться как проявление чрезмерной гормональной стимуляции.
Зрелые поверхностные клетки могут окрашиваться в синие базофильные тона (без содержания мукополисахаридов), а также в интенсивно красно-фиолетовые (при наличии крупных гранул мукополисахаридов в цитоплазме клеток). Иногда в центре цитоплазмы имеется небольшое перинуклеарное кольцо из остатков гликогена.
Чем сильнее эстрогенная стимуляция, тем больше появляется в мазках поверхностных эозинофильно окрашенных клеток. Во время нормального менструального цикла наибольшее число эозинофильных поверхностных клеток в мазках наблюдается в среднюю фолликулиновую фазу.
Selener, изучая структуру клеток вагинального эпителия, обнаружил, что клетки глубоких слоев, парабазальные и базальные, окрашиваются в голубые и голубовато-зеленые тона благодаря содержанию в них групп белка SH. Только более высокорасположенные клетки парабазального слоя содержат некоторое количество гранул гликогена в цитоплазме. В клетках промежуточного слоя гликоген обнаруживается вокруг ядер, а большая масса групп SH белка располагается в виде синего кольца, окружающего центральное ядро гликогена. Группы SH на периферии клеток смешиваются с изолированными группами мукополисахаридов. В более зрелых клетках пропорционально снижению содержания гликогена увеличивается количество мукополисахаридов.
Miiller и др. определяли гистохимическим методом содержание РНК в эпителии влагалища в различные периоды жизни женщины. Авторы обнаружили, что в детском возрасте содержание РНК достигает своего максимума незадолго до полового созревания. В пубертатный период происходят существенные изменения во влагалищном эпителии под действием эстрогенов. В репродуктивный период отмечается снижение содержания РНК. Второй пик подъема концентрации РНК падает на период климактерия. В постменопаузальный период содержание РНК почти так же низко, как и на первом году жизни. Эти данные показывают, что эстрогены оказывают большое влияние на синтез РНК, совпадают с преобладающим действием прогестерона. В то же время прогестерон усиливает синтез мукополисахаридов в клетках влагалищного эпителия.
Появление эозинофильного окрашивания цитоплазмы поверхностных клеток в детском возрасте или в глубокой менопаузе также свидетельствует о наличии патологических источников эстрогенной стимуляции. Эозинофильная окраска цитоплазмы поверхностных клеток является критерием в оценке эстрогенного влияния, так как величина эозинофильного индекса находится в прямой зависимости от силы и продолжительности эстрогенной стимуляции. По нарастанию эозинофильного индекса можно судить об увеличении эстрогенной стимуляции, тогда как об уменьшении последней свидетельствует падение ЭИ после бывшей ранее выраженной пролиферации. Поскольку ни прогестерон, ни андрогены не способны вызвать эозинофильной окраски цитоплазмы клеток, динамика изменения эозинофильного индекса будет являться показателем только эстрогенного влияния.
Числовой индекс созревания представляет собой сумму числовых значений каждого вида клеток, имеющихся в мазке. Для этого каждый тип клеток эпителия условно обозначается цифровой величиной:
Поверхностные эозинофильные клетки - 1,0
Базофильные клетки - 0,8
Большие промежуточные клетки - 0,6
Малые промежуточные клетки - 0,5
Парабазальные клетки - 0,0
При подсчете числового индекса созревания мазок должен включать только свободно отделившиеся клетки с нормальной морфологией. Подсчитывается в среднем 200 клеток, и число каждого вида клеток умножается на соответствующее числовое значение. Полученная сумма характеризует мазок. Таким образом, мазок, содержащий только парабазальные клетки, будет иметь показатель созревания 0.
Чем выше степень созревания эпителия, тем больше и мазках клеток с высоким числовым индексом и тем выше будет общая сумма, полученная при подсчете клеточного состава мазка.
Meisel при изучении мазков у 4000 пациенток в возрасте от 13 до 49 лет установил, что в 10-14 лет среднее «эстрогенное» значение (по автору) было больше 70, в 15-19 лет - меньше 70, в 20-39 лет - около 70, в 40-49 лет - ниже 70. При изучении числового значения созревания по дням цикла установлено, что оно имеет максимум на 13-й день цикла (среднее значение 60-90), держится на том же уровне 4 дня и затем постепенно снижается до 23-го дня цикла. После 23-го дня индекс созревания остается низким до начала очередных месячных .
Индекс складчатости представляет отношение всех складчатых зрелых поверхностных клеток к числу плоских зрелых поверхностных клеток.
Скручивание, или свертывание, клеток проявляется главным образом при прогестероновой стимуляции. Поверхностные плоские клетки при этом приобретают вид закругленного лепестка розы или сложенного в виде конверта листа. Индекс складчатости обозначается чаще в виде описания в дополнение к индексу созревания. Можно отражать индекс складчатости в процентах - отношением общего числа складчатых поверхностных клеток к числу плоских не свернутых клеток. При этом ни величина ядра клеток, ни окраска их цитоплазмы не принимаются во внимание.
Индекс скученности или группировки клеток представляет собой отношение зрелых клеток, находящихся в скоплениях от 4 и более, к зрелым клеткам, расположенным раздельно. Этот индекс так же, как и индекс складчатости клеток, отображает прогестероновое действие на влагалищный эпителий. Если эстрогены обладают способностью вызывать раздельное расположение клеток, то прогестерон вызывает десквамацию клеток, которые, отторгаясь, располагаются группами или пластами в зависимости от силы прогестероновой стимуляции. Этот индекс труден для цифрового выражения, и потому чаще всего он подлежит визуальному изучению и описанию по трехбалльной системе: выраженная скученность (+ + +), умеренная (++), слабая (+).
Индекс поверхностных клеток - это отношение всех зрелых поверхностных клеток к общему числу всех других отделившихся клеток. Данный индекс, видимо, малопоказателен, так как, в отличие от индекса созревания, пропадает указание на степень атрофии из-за того, что все незрелые клетки подсчитываются вместе.
Среди цитологов нередко обсуждается вопрос, какой из индексов наиболее применим и надежен для цитогормонального исследования и должны ли данные обычного цитологического исследования обозначаться в виде индексов.
Цитологическое исследование производится для получения более полной информации о гормональной стимуляции у женщины; ни один из индексов не в состоянии дать такую характеристику, так как для объективной оценки гормонального состояния нужна совокупность клинических данных: жалобы, возраст, характер менструальной функции (менопаузы), характер проводимой гормональной терапии (если она проводится), оперативные вмешательства или лучевая терапия (если они имели место). Только в свете клинических данных при учете других тестов функциональной диагностики может быть сделана правильная оценка мазка. Когда заинтересованный клиницист сам занимается изучением мазков, ценность цитологических исследований повышается. Тогда цитологические данные помогают и дополняют имеющиеся сведения о клинической картине нарушений, имеющих место у больной.
В случае, когда клиницист получает сведения о цитологическом исследовании от лаборатории, цитологу должны быть известны вышеуказанные клинические данные, а клиницист должен быть хорошо знаком со значением цитологических обозначений.
Ни один из вышеперечисленных индексов не может дать исчерпывающую информацию и ни один не может иметь преимущества перед другим. Каждый из индексов предназначен для определенной цели. Так, индекс созревания отражает степень пролиферации или атрофии; эозинофильный и кариопикнотический индексы не могут быть применены для оценки атрофии. Если речь идет о гормональном лечении или о нарушениях менструального цикла в репродуктивном периоде - ЭИ и КИ дополняют индекс созревания. Индексы свертывания и складчатости информируют о наличии прогестеронового влияния, но они чаще всего должны быть обозначенными на фоне динамики индекса созревания и динамики изменений ЭИ и КИ. Оценка с помощью одного из индексов может быть произведена только в случае выраженной атрофии или сильной пролиферации.
Действие гормональных препаратов может быть проверено только при сочетанием определении всех индексов; если же речь идет об изолированном действии эстрогенов, можно ограничиться тремя индексами - созревания, эозинофильным и кариопикнотический.
Однако существуют и такие гормональные ситуации, когда следует отдавать предпочтение одному из индексов. Так, например, при беременности ЭИ является более надежным, чем КИ, так как повышение одного КИ при низких уровнях ЭИ еще не свидетельствует о плохом прогнозе.
Выражение кольпоцитологических данных в виде индексов основывается только на изучении морфологического состава клеток. Оно должно быть дополнено оценкой состояния неэпителиальных элементов.
Как же следует описывать цитологическую картину влагалищного мазка?
Долгое время кольпоцитологические исследования основывались на визуальной оценке мазка по степени наличия в нем клеточного эпителия на разных стадиях созревания. Наибольшую популярность получила классификация Geist, Salmon. Согласно этой классификации различаются четыре реакции или типа клеточных изменений.
При I реакции мазки состоят из мелких клеток базального слоя с крупными ядрами, клетки вышележащих слоев полностью отсутствуют. В мазках почти всегда имеются лейкоциты. При этом состоянии слизистая влагалища тонка и состоит из нескольких слоев клеток. I реакция трактуется как состояние, связанное со значительным недостатком в организме эстрогенов.
II реакция, или тип, наблюдается при появлении несколько большей степени созревания влагалищного эпителия, когда в мазках находятся клетки верхней базальной зоны - парабазальные, более крупные, по своей конфигурации круглые или овальные. Ядра клеток остаются еще крупными (но уменьшаются по сравнению с клетками нижнего парабазального слоя). Подобные клеточные картины расцениваются как умеренные степени эстрогенной недостаточности.
При III реакции в мазках преобладают промежуточные клетки. Здесь могут встречаться единичные клетки вышележащих поверхностных слоев, так же как и нижележащих парабазальных. Присутствие лейкоцитов необязательно. Мазки III типа связываются с умеренной эстрогенной стимуляцией.
IV реакция, или тип, определяется при выраженной пролиферации влагалищного эпителия, когда в мазках преобладают крупные клетки поверхностного слоя, раздельно расположенные, с мелкими пикнотическими ядрами. Лейкоциты отсутствуют. Часто имеются палочки Дедерлейна. Гормональное состояние при мазках IV типа связывается с хорошей эстрогенной стимуляцией.
Использование классификации Geist, Salmon для определения гормональных изменений, происходящих в организме женщины, привело к отождествлению различных уровней пролиферации влагалищного эпителия со степенью «эстрогенной насыщенности» организма. Выражение «эстрогенная насыщенность» настолько вошло в литературу, что при ряде патологических состояний некоторые авторы стали отождествлять его с уровнем эстрогенов в организме. Несовершенство этой классификации явилось одной из причин того, что кольпоцитологическое исследование не стало развиваться далее и не нашло должного применения в диагностике нарушений менструального цикла.
Основные недостатки классификации Geist, Salmon заключаются в следующем.
1. Субъективизм в отношении оценки клеточных элементов, отсутствие точных числовых показателей. Один и тот же мазок разными исследователями может быть отнесен к различным типам, так как его оценка производится на основании визуального осмотра, без подсчета клеточных элементов разной степени зрелости. Вместе с тем метод подсчета клеточных элементов уже давно применяется в биологии и медицине. Клеточный состав мазка более прост для подсчета, нежели клеточный состав крови. Лаборатории, имеющие счетные клавишные аппараты, могут легко использовать их для ускорения вычислений. При оценке мазка на амбулаторных приемах врач в нескольких полях зрения, может подсчитать морфологический состав клеток и вывести их процентное соотношение. При проведении научной работы расчеты могут быть закодированы и подсчитаны на электронных машинах.
2. При оценке мазков по классификации Geist, Salmon упускается один из очень ценных критериев цитологического анализа - дифференцированная окраска клеточных элементов. При полихромной окраске клеток по мере их созревания под влиянием различной гормональной стимуляции зрелые поверхностные клетки окрашиваются в базофильные и эозинофильные тона. Как уже указывалось, только эстрогены способны вызвать появление эозинофильных поверхностных клеток в мазках, в то время как прогестерон и андрогены, вызывая пролиферацию влагалищного эпителия, не способны вызвать эозинофильного окрашивания цитоплазмы поверхностных клеток. Поэтому дифференцированное окрашивание клеток может быть диагностическим признаком, характеризующим различную гормональную стимуляцию.
Увеличение или уменьшение эозинофильных клеток могут быть показателем возрастающей или убывающей эстрогенной стимуляции. Так, например, уменьшение числа эозинофильных клеток во II фазе цикла после «пика», имевшего место в середине цикла, является одним из признаков нормального овуляторного цикла.
3. При оценке влагалищного мазка по классификации Geist, Salmon визуально не обращается внимание на изменения ядер поверхностных клеток. Вместе с тем величина ядер и степень их приближения к полной зрелости тесно связаны с силой и продолжительностью эстрогенного действия. Известно, что кариопикноз является проявлением максимального действия эстрогенов как в чистом виде, так и при явном преобладании эстрогенной стимуляции, если имеется комбинация гормональных влияний.
4. Наиболее серьезным недостатком классификации Geist, Salmon является отсутствие критериев для оценки прогестероновой стимуляции. Прогестерон вызывает характерные изменения, проявляющиеся в завертывании краев клеток, расположении их группами и скоплениями при массивной десквамации пластами.
5. Классификация Geist, Salmon мало пригодна для цитологической характеристики фаз менструального цикла, так как ранняя фолликулиновая и средняя лютеиновая фазы могут быть отнесены к III типу по данной классификации. Вместе с тем цитологическое исследование и тесты функциональной диагностики в основном используются для более полной характеристики этих фаз.
6. При оценке мазков по классификации Geist, Salmon не находит отражения андрогенное влияние.
Уже отмечалось, что указанная классификация была разработана авторами применительно к женщинам, находящимся в менопаузе; в силу простоты ее стали применять при цитологической оценке мазков у женщин всех возрастных групп. Для ориентировочной оценки гормонального статуса у женщин в менопаузальном периоде она, несомненно, использоваться может.
Кариопикнотический индекс
Кариопикнотический индекс – кольпоцитологический показатель, отражающий процентное соотношение количества отслоившихся зрелых клеток к остальным в мазке из влагалища. Результаты позволяют судить об эстрогенной насыщенности организма. КПИ определяется в рамках цитологического исследования гормонального фона. Результаты применяются для оценки функций яичников, диагностики бесплодия, угрозы прерывания беременности, нарушений менструального цикла, гормональных изменений при климаксе. Для исследования используется материал урогенитального мазка. Определение показателей производится цитологическим методом. Значения нормы зависят от фазы месячного цикла: 7-10 день – 20-25%, 14 день – 60-85%, 25-28 день – 30%. Подготовка результатов занимает 1 рабочий день.
Кольпоцитология – комплекс лабораторных тестов, направленных на изучение отторгнутых эпителиальных клеток влагалища, изменение их состава и соотношения в разные периоды цикла. Кариопикнотический индекс – один из исследуемых показателей. В его основе лежит явление кариопикноза – процесса созревания эпителиальных клеток, выражающегося уменьшением клеточных ядер, сморщиванием мембран. Пикнотические клетки имеют ядра диаметром менее 6 мкм. КПИ – соотношение количества клеток с пикнотическими ядрами к числу клеток с непикнотическими ядрами. Показатель выражается в процентах, коррелирует с концентрацией эстрогенов.
ПоказанияКариопикнотический индекс отражает эстрогенную насыщенность, функциональность яичников. Используется для определения дня овуляции, оценки гормонального фона в репродуктивном возрасте. В рамках кольпоцитологии тест показан в следующих ситуациях:
- Нарушения менструального цикла . Определение КПИ назначается при аменорее, опсоменорее, олигоменорее, дисфункциональных маточных кровотечениях. Результат выявляет изменение синтеза эстрогенов как причину нестабильности цикла.
- Бесплодие . Тест осуществляется с целью подтверждения/опровержения гормональных причин бесплодия, определения овуляции.
- Осложненная беременность . Исследование используется для мониторинга процесса вынашивания у женщин из групп риска (эндокринные патологии, выкидыши и преждевременные роды в анамнезе), выявляет угрозу самопроизвольного аборта.
- Климактерический синдром . Угасание репродуктивной функции сопровождается снижением уровня эстрогенов, проявляется приливами жара, потливостью, головными болями, учащенным сердцебиением, эмоциональной неустойчивостью. Анализ производится для диагностики синдрома.
- Патологии полового развития у девочек . Тест назначается для оценки функции яичников, надпочечников при преждевременности или задержке полового созревания, проявляющейся ранним началом/отсутствием менструаций, малыми размерами матки, молочных желез.
- Гормональная терапия . Исследование выполняется для контроля лечения эстрогенными препаратами, определения дозировки, длительности курса терапии.
Материалом для исследования является мазок, взятый с переднебоковой поверхности влагалища. Подготовка к процедуре состоит из ряда правил:
Мазок берется поскабливанием стенки влагалища аппликатором или шпателем. Биоматериал обрабатывается специальными препаратами, более интенсивно окрашивающими пикнотические ядра. С помощью микроскопа подсчитывается количество пикнотических и непикнотических клеток, определяется процентное соотношение.
Нормальные значенияДанные теста выражаются в процентах. Нормы кариопикнотического индекса при ненарушенном кислотно-щелочном балансе определяются фазой менструального цикла:
- Фолликулярная (после кровотечения, 7-10 день цикла) – 20-25%.
- Овуляторная (12-15 день) – 60-85%.
- Окончание лютеиновой фазы (25-28 день) – 30-35%.
При беременности референсные значения анализа иные. Они зависят от срока:
- I триместр – 0-18%.
- II триместр – 0-10%.
- III триместр – 0-3%.
- Перед родами – 15-40%.
В периоды менопаузы, постменопаузы значения КПИ колеблются от 0 до 80%. Их интерпретация производится с учетом других тестов кольпоцитологии.
Повышение значенияКПИ повышается при избытке эстрогенов – гиперэстрогенемии. Нарушение свидетельствует о ряде патологий:
- Эндокринные заболевания . Эстрогенная насыщенность повышается при синдроме поликистозных яичников, гормонсекретирующих опухолях и кистах яичников, гипертекозе, патологиях надпочечников, аутоиммунном тиреоидите, гипотиреозе, ХТГ-продуцирующих опухолях различной локализации.
- Риск самопроизвольного аборта . Во время беременности повышение значений теста выявляет угрозу выкидыша, преждевременных родов.
- Преждевременное половое созревание . Кариопикнотический индекс растет при избыточной активности надпочечников и яичников, у девочек до 8-10 лет он подтверждает ускоренное половое созревание.
- Ожирение . Жировая ткань содержит фермент, преобразующий андрогены в эстрогены.
- Болезни органов ЖКТ . Уровень эстрогенных гормонов повышается из-за нарушения их связывания и выведения.
- Прием лекарств . Гиперэстрогенемия развивается на фоне приема гормональных, противотуберкулезных и сахароснижающих препаратов, барбитуратов, антидепрессантов.
Снижение КПИ выявляет эстрогенную недостаточность – гипоэстрогенемию. Отклонение результата в меньшую сторону определяется в ряде случаев:
- Воспалительные заболевания половых органов . У женщин репродуктивного возраста снижение эстрогенов проявляется хроническими тяжелыми кольпитами, вагинитами.
- Нарушения месячного цикла . Кровотечения нерегулярные, выделения скудные, мажущие, предменструальный синдром выраженный.
- Задержка полового развития . Низкий КПИ у девушек 16 лет и старше выявляет гипофункцию яичников, сопровождается отсутствием либо слабой выраженностью вторичных половых признаков, поздним наступлением менархе.
- Патологии гипофиза . Нарушение синтеза эстрогенов определяется при гипофизарном нанизме, церебрально-гипофизарной кахексии, некрозе передней доли гипофиза.
- Прием лекарственных средств . Эстрогенная недостаточность может развиться при неправильном применении гормональных препаратов, антидепрессантов, ноотропов.
Кариопикнотический индекс – показатель эстрогенной насыщенности. Тест позволяет обнаружить избыток или недостаток женских половых гормонов, применяется для диагностики репродуктивного здоровья женщины, мониторинга беременности. Интерпретацией результата, назначением терапии занимается гинеколог, эндокринолог.
В нашей медицинской лаборатории проводится исследование мазка из влагалища на кариопикнотический индекс, которое позволяет оценить концентрацию эстрогена в женском организме, (выхода созревшей яйцеклетки, готовой к оплодотворению). Исследование используется для диагностирования патологических процессов в женской половой системе.
Что такое кариопикнотический индекс?Процесс созревания ядра эпителиальных клеток называется кариопикнозом (сморщиванием клеточного ядра), это явление предшествует кариорексису (распаду ядра клетки на части).
Кариопикнотический индекс (КПИ)
- это процентное соотношение клеток эпителия, имеющим пикнотичные ядра (до 6 мкм) к клеткам, которые не подверглись кариопикнозу (с везикулярными ядрами - от 8 до 10 мкм). Число кариопикнотического индекса зависит от силы гормонального воздействия на женский организм.
Исследование клеточного состава влагалища опытные специалисты назначают при нарушениях месячных, патологических гинекологических кровотечениях, осложненном климактерическом периоде для:
- оценивания функции яичников;
- выявления причин бесплодия и прерывания беременности;
- определения дня овуляции;
- диагностирования изменений гормонального фона;
- оценивания эффективности применения гормональных препаратов.
Методика проведения исследования
Биоматериал для исследования - мазок из влагалища - отбирает квалифицированный гинеколог. Специальной подготовки к процедуре не требуется, однако пациентке необходимо воздержаться два дня от полового контакта.
- во время месячных;
- при наличии воспалительного процесса (кольпита, цервицита);
- после выполнения медицинских процедур (спринцевания, манипуляций в цервикальном канале).
Квалифицированный врач-лаборант проводит микроскопию окрашенного мазка в разных полях зрения и подсчитывает форменные элементы.
Расшифровка данных анализаОсновная часть клеточных элементов содержимого вагины состоит из отторгшихся клеток различных эпителиальных слоев слизистой оболочки - поверхностных, промежуточных, пара-базальных, атрофических клеток. При подсчете результатов исследования учитывается период месячного цикла.
Показатели нормы кариопикнотического индекса:
- с 8 по 11 день (начальная фаза) - от 25 до 30%;
- на 14 день (процесс овуляции) - от 60 до 85;
- с 25 по 28 день (конечная фаза) - 35.
Повышение КПИ характерно для увеличения эстрогенной насыщенности, понижение свидетельствует о низком уровне эстрогена в организме женщины.
Срок проведения анализа: Стоимость проведения анализа: руб.Добавить в калькулятор
- Получить результаты анализов
- Акции и Скидки
- Пациентам
- Врачам
- Организациям
- Вызов на дом и в офис
- Где сдать анализы
- Полный список анализов
- Фотогалерея
Анализы Вопрос: Добрый вечер, хотел бы сдать анализы на заболевания передающиеся половым путём, сколько будет это стоить в Вашей лаборатории?
Ответ: Здравствуйте! У нас есть комплекс: "ПЦР диагностика ИППП "Безопасный секс" (HSV-1, HSV-2, CMV, Ch.trach., Myc.gen.,Myc.hom., Ureap.ureal./parvum, N.gon., Tr.vag.,Gardnerella vag., Candida alb.)" - 1999 руб., + "Госпитальный комплекс (HbsAg, Гепатит С (anti-HСV), АТ к ВИЧ, anti-Treponema Pallidum)" - 1560 рублей.
Комплекс анализов Вопрос: Подскажите, есть ли комплекс анализов для женщин. Основные инфекции передающиеся половым путем, венерические заболевания, спид, сифилис, гепатиты А,В,С. ?
Ответ: Здравствуйте! Предлагаем Вам сделать два комплекса: "Госпитальный комплекс (HbsAg, Гепатит С (anti-HСV), АТ к ВИЧ, anti-Treponema Pallidum)" - 1560 рублей и "Комплексное лабораторное исследование "Визит к гинекологу" (мазок гинекологический, неспецифический микробиологический посев с определением чувствительности к антибиотикам, ПЦР исследование на 11 инфекций ЗППП)" - 3399 руб..
1. Мазок на общую цитологию.
Цель: диагностическая
Задачи: взятие мазков из уретры, цервикального канала, влагалища для бактериоскопического и кольпоцитологического исследований
Показания: определение состояния биоценоза влагалища, диагностика воспалительных заболеваний
Оборудование: мыло, перчатки, гинекологическое кресло, зеркала, чистое сухое предметное стекло, бактериологическая петля, ложечка Фолькмана, теплый физиологический раствор (37˚С), емкости с дезрастворами, направление с указанием Ф.И.О. пациента, возраста, характера и даты взятия материала.
Методика:
а) Выписать направление.
б) Вымыть руки с мылом и осушить, надеть перчатки.
в) Больную уложить на гинекологическое кресло в спинно-ягодичном положении с разведенными и согнутыми в тазобедренных суставах ногами.
г) Первоначально берется материал из уретры, затем цервикального канала и влагалища.
д) Забор материала из уретры. Бактериологическую петлю ввести в уретру на 2-3см, плоскость «глазка» петли продвигать к отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковую стенки уретры. Извлечь петлю, наложить ее на поверхность предметного стекла, передвигая по нему несколько раз с легким нажатием.
е) Ввести зеркало в сомкнутом состоянии на всю глубину влагалища, раскрыть и фиксировать в таком положении с помощью замка.
ж) Забор материала из влагалища для приготовления нативного мазка. Бактериологическую петлю ввести в задний или боковой свод влагалища, произвести взятие материала. На предметное стекло нанести несколько капель теплого физиологического раствора. Вагинальные выделения перемешать с каплей физиологического раствора, накрыть покровным стеклом и направить в лабораторию.
з) Забор материала цервикального канала. Ложечку Фолькмана ввести в цервикальный канал на 1-2см, вращать несколько раз. Полученный материал нанести на предметное стекло и сделать тонкий ровный мазок в виде горизонтального штриха. Высушить на воздухе.
и) Извлечь зеркало из влагалища.
к) Замочить весь использованный материал: перчатки, инструменты, мягкий инвентарь в дезинфицирующем растворе.
л) Вымыть руки с мылом и осушить.
2. Мазок по Папаниколау (Паптест) - метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала. Метод даёт возможность оценить структуру и клеточный уровень повреждения тканей, попавших в мазокотпечаток. Цитологические критерии основаны на выраженности признаков клеточной атипии.
Выявление морфологических особенностей клеток, характеризующих конкретный патологический процесс.
Показания:
Скрининг РШМ (рак шейки матки).
Подготовка к исследованию:
В течение суток перед исследованием не следует проводить спринцевание и применять вагинальные препараты. Желательно воздержание от половых контактов в течение 1-2 дней до исследования. Нельзя брать материал для исследования во время менструации.
Для получения материала используют следующие инструменты: шпатель Эйра (для взятия мазков с поверхности эктоцервикса), ложечку Фолькманна, скринет, эндобранш (для взятия эндоцервикальных мазков и др.).
Для получения оптимальных результатов цитологического исследования необходимо забирать образцы отдельно с эктоцервикса и из эндоцервикса. Взятие материала осуществляют до проведения бимануального исследования.
После введения зеркал во влагалище, удаляют ватным тампоном выделения с поверхности шейки матки. В наружный маточный зев вводят наконечник шпателя Эйра, вращательным движением на 360 градусов с нажимом забирают клеточный состав с экзоцервикса (с многослойного плоского эпителия) и области стыка эндоцервикса и экзоцервикса (с зоны метапластического эпителия). Затем в цервикальный канал вводят специальную щеточку (cer-brash) на 1-2 см и вращательным движением берется материал со стенок цервикального канала. Полученный материал распределяют тонким слоем на поверхности обезжиренных, маркированных в соответствии с местом взятия, предметных стекол. Мазки высушивают на воздухе.
Интерпретация результатов: классификация цервикальных мазков по папаниколау
Первый класс - атипических клеток нет, нормальная цитологическая картина.
Второй класс - изменение морфологии клеточных элементов, обусловленное воспалительным процессом во влагалище и/или шейке матки.
Третий класс - единичные клетки с аномалиями цитоплазмы и ядер.
Четвёртый класс - отдельные клетки с явными признаками злокачественности: увеличение массы ядер, аномалии цитоплазмы, изменения ядра, хромосомные аберрации.
Пятый класс - в мазке наблюдают большое количество атипических клеток.
3. Методика взятия мазков на гормональную цитологию.
Динамика изменения кольпоцитологических показателей отражает суммарное колебание уровня яичниковых гормонов в организме на протяжении менструального цикла. Метод позволяет оценивать уровень эстрогенной, гестагенной, а, в ряде случаев, и андрогенной насыщенности организма.
Материал забирают из переднего свода шпателем или тампоном и равномерно наносят на предметное стекло. Серия мазков берется в динамике менструального цикла с ориентацией на его середину (сроки овуляции): 4-9, 10-13, 14-15, 16-20, 21-28-й дни цикла. После полихромной окраски в мазке исследуется соотношение парабазальных, промежуточных и поверхностных клеток, выражаемое в индексе созревания (ИС). Кариопикнотический индекс (КПИ) - процент клеток с мелкими, пикнотическими ядрами на 100 поверхностных клеток. Эозинофильный индекс (ЭИ) - процент эозинофильно окрашенных клеток поверхностных слоев на 100 поверхностных клеток. Максимальные значения всех трех показателей в сроки овуляции: ИС 0/15/85%, КПИ - 80,7± 9,3, ЭИ - 75,4 ±0,6.
Способ основан на том, что степень ороговения влагалищного эпителия находится в зависимости от насыщенности организма эстрогенными гормонами. Стенка влагалища выстлана многослойным плоским эпителием, в котором различают пять слоев: первые два самых глубоких слоя представлены базальными и парабазальными клетками, имеющими круглую форму, небольшую величину при относительно крупном ядре, окруженном венчиком протоплазмы; третий слой относится к клеткам промежуточного типа, которые крупнее, чем клетки базальных слоев, содержат ядро средних размеров и значительное количество базофильной протоплазмы; четвертый и пятый слои образуют поверхностные клетки многослойного эпителия, представляют собою крупные полигональные образования с небольшим ядром и ацидофильной протоплазмой. Кольпоцитологический метод относится к разряду эксфолиативных, так как исследованию подвергаются слущенные клетки. Для забора материала можно использовать два способа: содержимое заднего свода влагалища берется деревянным шпателем и размазывается на предметном стекле, либо при помощи длинной пипетки производится смыв из заднего свода небольшим количеством физиологического раствора, отсасывание содержимого и нанесение его на предметное стекло. У девственниц последний способ предпочтительнее. Обработка мазка может производиться в зависимости от дальнейшего способа исследования: либо простое окрашивание, либо полихромное, либо окрашивание высушенного мазка люминесцентными красителями.
Оценка реакции влагалищного эпителия (уровень насыщения организма половыми гормонами) производится по десятибалльной шкале Schmitt (1954), включающей следующие градации: 1, 1-2, 2-1, 2, 3-2, 2-3, 3, 3-4, 4-3, 4, при которой реакция 1 свидетельствует о резком, недостатке эстрогенных гормонов, а реакция 4 свидетельствует о высоком содержании гормонов. Помимо числовой оценки реакции, имеет значение и определение типа мазка, который может быть андрогенным, фолликулиновым, лютеиновым. Последнее разделение очень важно для учета, так как при одной и той же степени эстрогенной насыщенности, например реакции 3-4, мазок может быть либо фолликулинового, либо лютеинового типа. Помимо этого, обязательным является также определение процентного содержания во влагалищном мазке клеток различных слоев многослойного эпителия. Наибольшее распространение получило исследование кариопикнотического индекса (КПИ), т. е. вычисление отношения ороговевших клеток поверхностных слоев с пикнотическим ядром к другим клеткам мазка. С этой целью подсчитывается 100 или 200 клеток в мазке. Наиболее высокие показатели КПИ соответствуют наиболее высокому содержанию эстрогенов (рис. 7, 8).
Рис. 7. Графическое изображение экскреции фракций эстрогенов при нормальном менструальном цикле (по Е. И. Петранюк). а - экскреция эстрона; б - эстрадиола; в - эстриола.
Рис. 8. Колебания кариопикнотического индекса в течение двухфазного менструального цикла (по Zinser).
При нормальном менструальном цикле в начале его определяется обычно третья реакция влагалищного мазка. В мазке имеются клетки промежуточного слоя различной величины, расположенные, как правило, отдельно друг от друга (эстрогенный тип), КПИ - в пределах 20-25%; ко времени овуляции определяется 3-4-я или 4-3-я реакции, клетки эпителия становятся крупными, полигональными с маленьким, иногда пикнотическим ядром, с бледно окрашенной протоплазмой, располагаются отдельно или маленькими группами; после овуляции (воздействие прогестерона) клетки располагаются большими группами, скоплениями, имеют подвернутые края (ладьевидные клетки) - появляется картина, характерная для так называемого лютеинового типа мазка; КПИ к моменту овуляции достигает 60-80%.
Диагностическая ценность кольпоцитологического исследования очень велика и подтверждается результатами сравнительных исследований при использовании других методов (И. Д. Арист, 1961; М. Г. Арсеньева, 1963, и др.). Наиболее полное представление о фазах менструального цикла дает динамическое исследование мазков.
При кровотечениях, при воспалительных поражениях влагалища и шейки матки метод кольпоцитологии не может дать точного ответа о степени гормональной насыщенности организма, и поэтому в последние годы в подобных случаях (а также и у девственниц) прибегают к исследованию осадка мочи (уроцитограмма), поскольку эпителиальные клетки мочевыводящих путей на протяжении менструального цикла претерпевают закономерные изменения, находящиеся в соответствии со степенью насыщенности организма эстрогенами. Для цитологического исследования осадка мочи рекомендуется пользоваться первой порцией утренней мочи, затем мочу фильтруют через вату и осевшими на вате элементами делают мазок на предметном стекле; способ окраски - такой же, как при обработке влагалищного мазка. Оценка мазка производится по количеству ороговевших, ороговевающих, промежуточных, базальных и безъядерных элементов (рис. 9).
Рис. 9. Уроцитограмма при двухфазном менструальном цикле (по Castellanos, Sturgis).
По горизонтальной оси - число месяца и день цикла, по вертикальной - процентное содержание клеток: а - ороговевших; б - ороговевающих; в - промежуточных; г -базальных, а - безъядерных.
